[发明专利]一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合以及应用和方法

说明书

本发明提供了一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合以及应用和方法，属于DNA指纹图谱技术领域。本发明在枸杞基因测序结果基础上首次开发筛选出了具有多态性的15个SSR引物对，该15个SSR引物对可用于构建枸杞DNA指纹图谱，并结合毛细管电泳技术构建得到的枸杞DNA指纹图谱，具有电泳分辨率高、灵敏度高、数据分析处理便捷等特点，为DNA指纹图谱的在枸杞上的进一步应用研究提供了坚实的理论支持。

技术领域

本发明涉及DNA指纹图谱技术领域，具体而言，涉及一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合以及应用和方法。

背景技术

枸杞是我国传统的中药材，在中药材领域具有重要的地位。宁夏作为枸杞地道产区，枸杞种植历史悠久，在枸杞育种、栽培、加工等方面成果颇丰。近年来，随着枸杞育种方法的不断进步，新的枸杞品种也不断涌现，这些枸杞种质资源有许多优异品种未能被合理利用。因此，将这些枸杞种质资源进行有效分类和鉴定，对枸杞种质资源的研究、品种创新尤为重要。

DNA指纹图谱技术对植物品种进行分离和鉴定的有效手段。DNA指纹图谱是指DNA样品用特定分子标记技术处理显示出具有特定DNA片段的总称。DNA指纹图谱技术最早用于在刑侦或亲子鉴定上确定人的身份，而后随着生物技术的进步与发展，DNA指纹图谱技术在很多植物上得到广泛的应用。目前，常用于构建DNA指纹图谱的分子标记有SSR、AFLP、SRAP、SCoT、RAPD、SNP以及ISSR。不同分子标记构建的DNA指纹图谱各有其特点。其中，以ISSR、SSR、SRAP应用最广泛。

目前，DNA指纹图谱的在枸杞上的应用研究并不多，由其是以SSR分子标记技术来构建枸杞DNA指纹图谱的更未见报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合，该引物组合可用于构建出枸杞DNA指纹图谱。

本发明的另一目的在于提供上述引物组合在构建枸杞DNA指纹图谱中的应用。

本发明的另一目的在于提供构建枸杞DNA指纹图谱的方法，该方法所构建出的枸杞DNA指纹图谱能够准确反应出枸杞DNA指纹图谱的信息。

本发明的另一目的在于提供采用上述方法得到的枸杞DNA指纹图谱在鉴定枸杞种质资源中的应用。

本发明是这样实现的：

一种用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合，其包括第1-15引物对，上述第1-15引物对的碱基序列分别如SEQ ID NO.1-2、SEQ ID NO.3-4、SEQ ID NO.5-6、SEQ ID NO.7-8、SEQ ID NO.9-10、SEQ ID NO.11-12、SEQ ID NO.13-14、SEQ ID NO.15-16、SEQ ID NO.17-18、SEQ ID NO.19-20、SEQ ID NO.21-22、SEQ ID NO.23-24、SEQ ID NO.25-26、SEQ IDNO.27-28、SEQ ID NO.29-30所示。

上述的用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合在构建枸杞DNA指纹图谱中的应用。

一种构建枸杞DNA指纹图谱的方法，其包括：用上述的用于构建枸杞DNA指纹图谱的引物组合的第1-15引物对分别对多个枸杞种质的DNA进行PCR扩增，得到扩增产物；

将上述扩增产物分别进行电泳，得到扩增带型数；

将上述扩增带型数进行编码处理，得到每一种上述枸杞种质的DNA对应上述第1-15引物对的第1-15编号，串联上述第1-15编号形成字符串。

上述的构建枸杞DNA指纹图谱的方法所得到的枸杞DNA指纹图谱在鉴定枸杞种质资源中的应用。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：