[发明专利]一种氧化钇-四氧化三铁复合纳米抑菌材料的制备与应用

权利要求书

1.利用氧化钇-四氧化三铁复合物纳米材料抑菌的方法，其特征在于，包括如下步骤：

a)取2~5 mg氧化钇-四氧化三铁复合物纳米材料于试管中，加入无水乙醇消毒，然后离心去除酒精，加入灭菌水充分悬浮；

b)称取20~50 g胰蛋白胨大豆肉汤培养基搅拌溶于0.5~2.0 L水中，即得到胰蛋白胨大豆肉汤，将胰蛋白胨大豆肉汤均分成两份；在其中一份胰蛋白胨大豆肉汤中加入5~10 g琼脂粉，即得胰蛋白胨大豆琼脂培养基；然后置于高压灭菌锅中灭菌；将灭菌后的胰蛋白胨大豆琼脂培养基制成平板以备用；

c)取-80℃下保存的大肠杆菌及葡萄球菌分别在胰蛋白胨大豆琼脂培养基平板上划板，倒置活化培养过夜；然后挑取单克隆于含3~6 mL 胰蛋白胨大豆肉汤培养基的试管中，在摇床上培养过夜，取0.5~1.5 mL菌离心去除培养基，再用含5~15 g氯化钠的灭菌水将菌稀释，即得大肠杆菌及葡萄球菌的试验用菌；

d)取不同量步骤a)产物加入到2~8 mL步骤c)的产物中，从而将步骤a)产物配制成10~100mg/L的工作浓度；随后将这些溶液分置于黑暗和光照下处理；

e)将步骤d)的产物稀释，再各取50~200 ul均匀涂在胰蛋白胨大豆琼脂培养基平板上，倒置培养过夜并计数；

f)计算细菌去除率或抑菌率 = (C₀ − C₁)/C₀ × 100% （C₀菌液中不加材料处理后的CFU，C₁菌液中加入材料处理后的CFU）；

步骤a)所述的加入无水乙醇的体积为1~1.5毫升，消毒时间为5~20分钟，加入灭菌水的体积为0.5~1.5毫升；

步骤b)所述的高压灭菌的温度为120~125℃，灭菌时间为10~30分钟；

步骤c)所述的活化培养温度为32~38℃，摇床培养温度为32~38℃，转速为150~220转/分，稀释后的浓度为0.5~1.0×10⁷CFU/mL；

步骤d)所述处理时间0.5~2小时；处理时的温度为32~38℃，光的功率为300~500瓦；

步骤e)所述的稀释后的浓度范围为10^-1~10^-4稀释度，培养温度为32~38℃。