[发明专利]一种用于美容保养的干细胞深层修复精华液

说明书

本发明涉及老化及损伤皮肤修复技术领域，尤其是一种含有丰富干细胞因子的肌肤深层修复精华液，所述肌肤深层修复精华液是在无血清培养基中培养脂肪间充质干细胞分离纯化浓缩而来，可以有效修复老化及损伤皮肤。

技术领域

本发明涉及老化及损伤皮肤修复技术领域，尤其是一种含有丰富干细胞因子的肌肤深层修复精华液。

背景技术

皮肤由于其特殊性，易遭受外界环境的影响而出现老化及损伤。随着生活质量及生活水平的提高，对于肌肤的保养也日益受到人们的关切和重视。由于目前化妆品市场中多数品种都含有铅、汞、酒精、防腐剂、激素及香料等有害物质，虽然短期内能够去除老化皮肤、使皮肤光亮嫩滑，但是长期使用容易使皮肤产生深层次及不可逆性损伤，严重的甚至产生过敏等症状。同时，残留时间过长的问题将导致对皮肤产生长期不利的影响。

本发明是采用生物技术手段，从干细胞培养液中精提各类生物活性成分，与羟基苯甲酸乙酯、维生素E、柠檬酸、透明质酸钠、及各类生物活性成分按照一定比例制成一种用于美容保养的干细胞深层修复精华液，在保持较好的生物活性的同时，具备较好的生物安全性，具有一定的推广及市场应用潜力。

发明内容

发明所需解决的问题

解决现有纯化精提技术不足及生物活性维持不足的问题，提供一种用于美容保养的干细胞深层修复精华液，同时通过合理的搭配，满足化妆品使用需求，达到优良的使用效果。

用于解决课题的方法

为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

采用超声破碎、超滤及低温旋蒸技术，纯化到化妆品级使用要求，保持原有的生物活性；

一种用于美容保养的干细胞深层修复精华液，由以下含量的成分构成：

人源化干细胞活性成分提取液包含胶原蛋白(2～5mg/L)、抗炎因子(1～1.5mg/L)、转化生长因子(2～3mg/L)、白介素(1～1.5mg/L)、粒细胞集落刺激因子(2～5mg/L)、干细胞因子(3～4.5mg/L)、内皮细胞生长因子(2～5mg/L)、成纤维细胞生长因子(2～5mg/L)、表皮细胞生长因子(2～5mg/L)等。

本发明为了实现对人源化干细胞活性成分提取液的生产制备，采用的技术方案操作如下：

1)获取脂肪组织细胞：用含有青链霉素的磷酸盐缓冲液反复冲洗新鲜的脂肪组织3-5次，将脂肪组织剪成小块，将剪碎的块状组织均匀平铺在培养瓶中，37℃二氧化碳培养箱内静置贴壁4-6h，待组织块完全贴壁后，将含有青链霉素的无血清干细胞培养基加入到培养瓶内，然后继续培养；

2)脂肪组织细胞原代培养：待1)中脂肪组织块爬出细胞后，将组织块取出，用含有青链霉素的磷酸盐缓冲液冲洗贴壁细胞2-3次，倒掉缓冲液，加入适量胰酶，待细胞边缘微微翘起时，终止消化，取细胞，1500rpm离心，得细胞沉淀；用磷酸盐缓冲液二次重悬，再次1500rpm离心，得细胞沉淀；用含有青链霉素的无血清干细胞培养基重悬细胞，将细胞转移至新的培养瓶内，继续培养；

3)脂肪组织细胞传代：用胰酶消化原代培养的脂肪组织细胞，在细胞边缘微微翘起时，终止消化，取细胞，1500rpm离心，得细胞沉淀；用磷酸盐缓冲液二次重悬，再次1500rpm离心，得到细胞沉淀；用含有青链霉素的无血清干细胞培养基重悬细胞，将细胞按照1：3比例进行传代培养；

4)收集干细胞培养液及干细胞：将传代3-5代的细胞离心收集上清液，并分离获取相应的干细胞；

5)超声破碎干细胞：将分离获取的干细胞进行低频超声破碎，频率调节到保证破碎细胞的同时，对于活性蛋白损伤降低到近似于零；