[发明专利]软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法

权利要求书

1.软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

(1)、选择软脚红杆铁皮石斛品种性状显著、遗传基因相对稳定，且经植物基因测序确认的植株作为母本和父本种源；

(2)、将作为母本和父本种源的软脚红杆铁皮石斛幼苗置于大棚，隔离栽培生长，大棚内空气相对湿度保持在80％～90％，温度20～25℃，日照时数：10h/天，2.2×10⁴～3×10⁴lux光强，且通风条件良好；

(3)、待软脚红杆铁皮石斛生长开花至花期绽放，选择花蕾绽放24h内的晴天上午10：00～13：00时段进行人工异花授粉，授粉成功的花朵会在7天内子房逐渐开始膨大坐果形成果荚；

(4)、将培育成熟的果荚通过植物组织培养扩大繁殖；所述植物组织培养分为两个阶段：种子培养和原球茎悬浮培养；

所述种子培养的具体操作为：(a)对人工授粉的铁皮石斛果荚进行杀菌消毒；(b)在无菌条件下，把种子接种到萌芽培养基上，所述培养基为N6培养基，蔗糖浓度1.6～2.2％，NAA浓度0.2～0.5mg/L；培养温度25～28℃，光照度1600～2000lx，光照10～12h/天；(c)生根瓶苗：种子萌发后，转瓶3～4次，当幼苗长出4～5片真叶，并具有3～4条1～2cm长的根时，可将试管苗进行练苗后移栽；生根瓶苗的培养基为MS+NAA0.2mg/L+土豆汁10％；

所述圆球茎悬浮培养的具体操作为：悬浮培养的培养基为1/4MS+维生素C40mg/L，pH5.6，摇床转速为50r/min，15天继代一次，黑暗培养，得到分散性好、整齐均一的原球茎。

2.根据权利要求1所述软脚红杆铁皮石斛选育及系代繁育方法，其特征在于，所述步骤(4)种子培养的具体操作(a)杀菌消毒的具体操作为：用75％的酒精对铁皮石斛果实表面消毒，30s后再用0.1％升汞消毒8min，无菌水冲洗4～5次。