[发明专利]一种同时测定五味子中7种木脂素含量的方法

说明书

本发明提供了一种同时测定五味子中的7种木脂素含量的方法，采用色谱柱ZORBAX Eclipse Plus C18 column(1.8μm，100mm×2.1mm)；流动相乙腈‑水梯度洗脱；流速0.3mL·min‑1；柱温40℃；检测波长220nm；进样体积1μL。结果：各成分即五味子醇甲、五味子醇乙、五味子酯甲、五味子酯乙、五味子甲素、五味子乙素、五味子丙素之间基本达到基线分离，且它们线性关系良好，平均加样回收率在98.29％～102.5％之间，RSD在1.4％～1.9％之间。实验结果表明该方法快速、稳定、可靠，适用于不同产地南、北五味子中木脂素含量的测定和鉴别南、北五味子。

技术领域

本发明属于医药领域，涉及中药材活性成分的检测技术，具体涉及南、北五味子中7种木脂素含的量测定方法及应用。

背景技术

2015版《中国药典》规定，五味子为木兰科植物五味子Schisandra chinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果实，习称“北五味子”【参见：《中国药典》一部[S].2015】，其主要分布区从东北亚(俄远东、朝、韩、日)延伸至我国东北、华北和秦岭北坡【参见：呉征鎰，路安民，湯彦承，等.中国被子植物科属综论[J].2003】。而南五味子则为木兰科植物华中五味子Schisandra sphenanthera Rehd.et Wils.的干燥成熟果实^[1]，主要分布于陕西、山西、甘肃、江西、湖南、四川、云南等地【参见：中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志.第三十卷,第一分册[M].北京:科学出版社,1996.252-261.】。目前普遍认为木脂素类成分是五味子和南五味子的主要活性成分，具有抗炎【参见：Kang O H,Chae H,Choi J,etal.Effects of the Schisandra fructus water extract on cytokine release from ahuman mast cell line[J].JOURNAL OF MEDICINAL FOOD,2006,9(4):480-486.】、抗氧化【参见：1.Liu C,Zhang S,Wu H.Non-thermal extraction of effective ingredientsfrom Schisandra chinensis Baill and the antioxidant activity of its extract[J].Nat Prod Res,2009,23(15):1390-1401；2.Hu D,Cao Y,He R,et al.Schizandrin,anAntioxidant Lignan fromSchisandra chinensis,Ameliorates Aβ1–42-Induced MemoryImpairment in Mice[J].Oxidative Medicine and Cellular Longevity,2012,2012:1-7.】、抗艾滋^[7]【参见：Xu L,Grandi N,Del Vecchio C,et al.From the traditionalChinese medicine plant Schisandra chinensis new scaffolds effective on HIV-1reverse transcriptase resistant to non-nucleoside inhibitors[J].Journal ofMicrobiology,2015,53(4):288-293.】、保肝【参见：1.Bi H,Li F,Krausz K W,etal.Targeted Metabolomics of Serum Acylcarnitines Evaluates HepatoprotectiveEffect of Wuzhi Tablet(Schisandra sphenanthera Extract)against AcuteAcetaminophen Toxicity[J].Evidence-Based Complementary and AlternativeMedicine,2013,2013:1-13；2.Sung M,Park S S,Kim S,et al.Antioxidant activityand hepatoprotective effect of Schizandra chinensis Baill.Extracts containingactive components in alcohol-induced HepG2 cells[J].Food Science andBiotechnology,2014,23(5):1615-1621；3.Xie Y,Hao H,Kang A,et al.Integralpharmacokinetics of multiple lignan components in normal,CCl4-induced hepaticinjury and hepatoprotective agents pretreated rats and correlations withhepatic injury biomarkers[J].Journal of Ethnopharmacology,2010,131(2):290-299.】、降糖【参见：Zhao T,Mao G,Zhang M,et al.Anti-diabetic effects ofpolysaccharides from ethanol-insoluble residue of Schisandra chinensis(Turcz.)Baill on alloxan-induced diabetic mice[J].Chemical Research inChinese Universities,2013,29(1):99-102.】等作用。然而作为药用时并不只是某一种或几种成分起作用，很多成分都具有不同的药理活性，不同组分之间还有协同作用。而且不同产地的南、北五味子成分、含量也有较大的差异，仅仅通过一种或几种成分的含量为指标并不能真正反映其内在质量。此外，随着对五味子研究的深入，应用的广度和深度逐渐加大，如保健品、食品、饮料【参见：聂江力，付玉杰，王振宇，等.黑龙江省五味子资源及其保健品开发利用(英文)[J].植物研究,2002,22(01):121-124.】等。因此，同时测定具有生理活性的7种木脂素，可为南、北五味的质量控制和药材应用提供参考依据。目前五味子木脂素类成分含量测定的液相方法普遍采用HPLC法【参见：1.Wei H,Sun L,Tai Z,et al.A simpleand sensitive HPLC method for the simultaneous determination of eightbioactive components and fingerprint analysis of Schisandra sphenanthera[J].Analytica Chimica Acta,2010,662(1):97-104；2.王天骄，张宇航，张铁伦.用HPLC法测定五味子颗粒中的6种木质素类成分含量的效果研究[J].当代医药论丛,2015(22):37-38.】，然而该方法存在用时长，有机溶剂消耗多等不足。长期以来，探索建立一种快速、稳定、可靠，并适用于不同产地南、北五味子中木脂素含量的测定且能用于鉴别南、北五味子的方法是本领域的重要课题。