[发明专利]一种以左旋多巴为底物全细胞转化合成咖啡酸的方法有效

专利信息
申请号: 201611158372.2 申请日: 2016-12-15
公开(公告)号: CN106755135B 公开(公告)日: 2020-04-21
发明(设计)人: 周景文;陈坚;吕永坤;堵国成 申请(专利权)人: 江南大学
主分类号: C12P7/42 分类号: C12P7/42;C12N1/21;C12R1/19
代理公司: 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211 代理人: 彭素琴
地址: 214122 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 左旋多巴 底物全 细胞 转化 合成 咖啡 方法
【权利要求书】:

1.一种咖啡酸的高效全细胞转化方法,其特征在于,以表达酪氨酸氨基裂合酶RgTAL的重组大肠杆菌,全细胞催化左旋多巴转化合成咖啡酸;所述的酪氨酸氨基裂合酶RgTAL的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述重组大肠杆菌以大肠杆菌BL21(DE3)为宿主,以pET-28a(PB)为表达载体;全细胞转化体系的反应介质为10-200 mM的磷酸盐缓冲液,全细胞转化体系中重组大肠杆菌的浓度为OD600=20±1,底物浓度范围为0.01-10 g/L,所述的全细胞转化体系的pH范围为6.0-9.0,反应温度范围为25-42 oC。

2.根据权利要求1所述的一种咖啡酸的高效全细胞转化方法,其特征在于,编码酪氨酸氨基裂合酶的基因RgTAL通过限制性酶切位点Bam HI/Hind III亚克隆至表达载体pET-28a(PB)。

3. 根据权利要求1所述的一种咖啡酸的高效全细胞转化方法,其特征在于,全细胞转化的反应介质为50 mM的磷酸盐缓冲液,全细胞转化体系中重组大肠杆菌的浓度为OD600=20±1,底物浓度为1 g/L,所述的反应体系的pH范围为7.5,反应温度范围为37 oC。

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