[发明专利]一种丝棉木组织培养的培养基及方法有效
申请号: | 201611155841.5 | 申请日: | 2016-12-14 |
公开(公告)号: | CN106577283B | 公开(公告)日: | 2018-07-24 |
发明(设计)人: | 张丹;张茂;孟伟芳;何甜甜;王东超 | 申请(专利权)人: | 河南红枫种苗股份有限公司 |
主分类号: | C12N5/04 | 分类号: | C12N5/04;A01H4/00 |
代理公司: | 北京集佳知识产权代理有限公司 11227 | 代理人: | 赵青朵 |
地址: | 450000 河南省郑州*** | 国省代码: | 河南;41 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 丝棉 组织培养 培养基 方法 | ||
1.丝棉木组培培养基,其特征在于,包括诱导丝棉木丛生芽的培养基、诱导丝棉木丛生芽生根的培养基、丝棉木组培苗炼苗的培养基;其中:
所述诱导丝棉木丛生芽的培养基为含有0.5mg/L KT、0.05mg/L NAA、0.1mg/L TDZ、0.01mg/L赤霉素、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的1/2MS培养基,pH值为5.85;
所述诱导丝棉木丛生芽生根的培养基为含有0.5mg/L KT、0.03mg/L TDZ、30g/L蔗糖和7g/L琼脂的MS培养基,pH值为5.80;
所述丝棉木组培苗炼苗的培养基为含有20g/L蔗糖和7g/L琼脂的WPM培养基,pH值为5.80。
2.根据权利要求1所述的培养基,其特征在于,所述丝棉木的品种为金枝玉叶。
3.一种丝棉木的组织培养方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:将丝棉木外植体接种到权利要求1所述诱导丝棉木丛生芽的培养基,培养至产生愈伤组织;
步骤2:所述愈伤组织接种至权利要求1所述的诱导丝棉木丛生芽生根的培养基,培养至分化出小苗;
步骤3:所述小苗转接到权利要求1所述的丝棉木组培苗炼苗培养基,培养后,经室外炼苗,得到丝棉木幼苗;
所述丝棉木的品种为金枝玉叶。
4.根据权利要求3所述的组织培养方法,其特征在于,所述外植体为金枝玉叶的枝条,经消毒后切成1~1.5cm的带腋芽的茎段。
5.根据权利要求4所述的组织培养方法,其特征在于,所述消毒处理具体为:将金枝玉叶的枝条用水冲洗后,以NaClO溶液清洗,然后经酒精浸泡、HgCl溶液浸泡,再用水浸泡。
6.根据权利要求5所述的组织培养方法,其特征在于,
所述用水冲洗的时间为45min;
所述NaClO溶液中NaClO的质量分数为0.1%;
所述酒精中乙醇的体积分数为75%,酒精浸泡的时间为90s;
所述HgCl溶液中HgCl的质量分数为0.1%,HgCl溶液浸泡的时间为2min;
所述用水浸泡的次数为6次,每次不短于3min。
7.根据权利要求3所述的组织培养方法,其特征在于,步骤1、步骤2、步骤3中所述培养的光照周期为12h/d,光照强度为3500lx,培养温度为25℃,相对湿度为60%,每天用紫外灯灭菌15min。
8.根据权利要求3所述的组织培养方法,其特征在于,步骤3中所述室外炼苗为:取出组培苗,洗掉根部附着的培养基,晾干水分后栽植至培养土中,喷施含有多菌灵和代锌蒙森混合液,放置背光处,覆膜保湿,保持温度在15~20℃之间;待长出新叶后将苗挪至向阳处,并逐渐去掉覆膜,30d后转入正常养护。
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