[发明专利]一种阿氏芽孢杆菌及其菌剂和制备方法与应用

权利要求书

1.一种阿氏芽孢杆菌，其特征在于所述阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai）BC104为高效氯氰菊酯的降解菌，保藏单位：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心（CGMCC），保藏日：2015年12月15日，保藏编号：CGMCC No. 11664；所述阿氏芽孢杆菌属于细菌界，厚壁菌门门，芽孢杆菌纲，芽孢杆菌目，芽孢杆菌科，芽孢杆菌属。

2.根据权利要求1所述阿氏芽孢杆菌，其特征在于所述阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai） BC104的生物学特征为：革兰氏染色反应阴性，菌体短杆状，有鞭毛，无芽孢，大小为（0.6μm~1.2μm）×（1.0μm~2.0μm），菌落表面平坦湿润，接触酶阳性，氧化酶、磷酸酶、酯酶、半乳糖苷酶为阳性，胰蛋白酶、芳胺酶为阴性，能利用β-环糊精、淀粉、葡萄糖、吐温40，不能利用乙酸盐、柠檬酸盐、山梨醇、鼠李糖，甲基红试验阴性。

3.一种以权利要求1或2所述阿氏芽孢杆菌为活性成分的菌剂，其特征在于是以所述阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai）BC104经活化培养、发酵培养后制成的菌剂。

4.一种权利要求3所述菌剂的制备方法，其特征在于包括活化培养、发酵培养步骤，具体包括：

A、活化培养：将阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai）BC104接种到无机盐培养液中，于温度25~35℃、震荡频率100~250rpm的条件下震荡培养12~24h得到液体发酵种子；

B、发酵培养：将液体发酵种子按培养基体积1~10%的量接种入发酵罐，在25~35℃下培养24~48h，搅拌速度为100~300rpm，空气流量为0.1~1.0vvm，得到阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai）BC104发酵液；

C、将阿氏芽孢杆菌（Bacillus aryabhattai）BC104发酵液离心、弃上清，用10~100倍的pH值为7.0的磷酸缓冲液悬浮得到目标物阿氏芽孢杆菌为活性成分的菌剂。

5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述A步骤中无机盐培养液的配方为NaCl 1g、K₂HPO₄ 1.5g、KH₂PO₄ 0.5g、（NH4）₂SO₄2.0g、MgSO₄ 0.1g，1mL微量元素溶液，蒸馏水补足至1000mL，混合后搅拌均匀，自然pH值，高压蒸汽灭菌后制得，所述的微量元素溶液的配制方法为：MnSO₄·H₂O 0.1g、ZnCl₂ 0.2g、CuSO₄·H₂O 0.02g、Na₂MoO₄·2H₂O 0.1g，用蒸馏水补足至1000mL。

6.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述B步骤中所述的培养基为LB液体培养基，是将酵母粉10g、蛋白胨5.0g、氯化钠10.0g以蒸馏水补足至1000mL，混合后搅拌均匀，自然pH值，高压蒸汽灭菌后制得。

7.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述C步骤中离心的转速为5000~7000rpm/min，离心时间为2~4min。

8.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于所述pH值为7.0的磷酸缓冲液是取0.2mol/L的磷酸二氢钠39ml和0.2mol/L的磷酸氢二钠61mL，用超纯水定容至1000mL，高压蒸汽灭菌后即得。

9.一种权利要求3所述菌剂在制备降解高效氯氰菊酯的药物中的应用。