[发明专利]靶向Grb2蛋白的抗肿瘤共价多肽抑制剂及其制备方法和应用

说明书

本发明涉及靶向Grb2蛋白的抗肿瘤共价多肽抑制剂及其制备方法和应用。所述的共价多肽抑制剂的氨基酸序列为：VPPPVPPRRX，其中X为(2S)‑2‑氨基‑3‑[(2‑氯乙酰)氨基]丙酸。所述的制备方法为Fmoc固相多肽合成法，X的原料为Fmoc‑Dap(Mtt)‑OH和氯乙酸。本发明的共价多肽抑制剂对Grb2蛋白有极高的亲和性，故其会避免“脱靶”共价反应，因此治疗效果好，克服了现有技术中共价多肽药物存在毒副作用的难题。本发明为共价抑制剂药物研发提供了一条新思路，将有助于乳腺癌等疾病的治疗。

技术领域

本发明涉及分子生物学和医药技术领域，具体地说，涉及一种靶向Grb2蛋白的抗肿瘤共价多肽抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术

共价抑制剂是现有药物抑制剂中唯一可完全沉默或永久关闭致病蛋白的一类药物，其作用机理是共价抑制剂能与目标蛋白中特定某一个或几个氨基酸残基发生共价反应，从而抑制目标蛋白的相关活性，以此达到治疗疾病的目的。相较于常规非共价药物，共价药物用量少且效果持久。近年来美国FDA和我国CFDA已通过一些此类药物的审批并应用于临床。由于共价抑制剂的独特治疗优势，它也被用于肿瘤治疗研究中，并已得到了一些显著的效果。如Neubig和其同事利用一珠一化合物(one-bead one-compound，OBOC)库筛选方法得到了一个可与调节G蛋白信号蛋白4(RGS4)共价结合的多肽，通过共价抑制RGS4达到了调控肿瘤相关蛋白G蛋白的目的，进而抑制G蛋白偶联受体相关信号。Taunton和其同事开发了一种可与乳腺癌细胞MDA-MB-231中核糖体蛋白激酶RSK2共价结合的共价抑制剂，并取得了良好的抑瘤效果。虽然共价药物在抑制蛋白生物活性方面显示了强大作用，但一些共价抑制剂会与细胞中非特异的蛋白发生反应，这种“脱靶”共价反应会给机体带来很强的毒副作用，严重阻碍了共价抑制剂的发展。

生长因子受体结合蛋白2(Growth factor receptor bound protein 2，Grb2)是一类衔接蛋白，其由一个中间的SH2(Src homology 2)结构域和位于两端的SH3(Srchomology 3)结构域组成。研究发现Grb2在乳腺癌中呈高表达状态，其表达水平与淋巴结转移及预后相关。在乳腺癌细胞中Grb2与蛋白Sos(son of sevenless)相互作用并通过调控受体酪氨酸激酶(receptor tyrosine kinase，RTK)信号通路来促进肿瘤细胞的侵袭和转移。

靶向Grb2蛋白的共价抑制剂类药物在治疗乳腺癌中同样存在“脱靶”问题，造成药物毒副作用较大，且治疗效果欠佳。由此可见，有必要设计一种与Grb2特异发生共价反应、不易脱靶的药物。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种靶向Grb2蛋白的抗肿瘤共价多肽抑制剂。

本发明的再一的目的是，提供所述的共价多肽抑制剂的制备方法。

本发明的另一的目的是，提供所述的共价多肽抑制剂的用途。

为实现上述第一个目的，本发明采取的技术方案是：

一种靶向Grb2蛋白的抗肿瘤的共价多肽抑制剂，所述的共价多肽抑制剂的氨基酸序列为：VPPPVPPRRX，其中X为(2S)-2-氨基-3-[(2-氯乙酰)氨基]丙酸。

为实现上述第二个目的，本发明采取的技术方案是：

所述的共价多肽抑制剂的制备方法，所述的制备方法为Fmoc固相多肽合成法。

X的原料为Fmoc-Dap(Mtt)-OH和氯乙酸。

为实现上述第三个目的，本发明采取的技术方案是：

所述的共价多肽抑制剂在制备治疗Grb2蛋白介导的疾病的药物中的应用。

所述的Grb2蛋白介导的疾病为肿瘤。