[发明专利]利用甲醇的产油酵母工程菌株构建方法及工程菌和应用

权利要求书

1.一种利用甲醇的产油酵母工程菌株构建方法，其特征在于：利用基因工程技术在产油酵母中表达甲醇代谢相关的基因，得到可利用甲醇为碳源生长的基因工程菌株；

所述产油酵母为油脂酵母属Lipomyces、丝孢酵母属Trichosporon、隐球酵母属Cryptococcus、冬孢酵母属Rhodosporidium、红酵母属Rhodotorula中的一种；

所述甲醇代谢相关的基因为：甲醇脱氢酶MDH编码基因MDH、己糖磷酸合酶HPS编码基因HPS和磷酸己糖异构酶PHI编码基因PHI；

所述的基因MDH、HPS、PHI，其DNA序列分别来源于Bacillus methanolicus，Methylococcus capsulatus，M.flagellatus，或按照产油酵母密码子偏好性进行优化，优化后序列分别如SEQ ID No.1所示的核苷酸序列、SEQ ID No.2所示的核苷酸序列和序列SEQ ID No.3所示的核苷酸序列。

2.根据权利要求1所述方法，其特征在于：将所述的基因MDH、HPS和PHI构建成表达盒，转化产油酵母，得到可利用甲醇为碳源生长的基因工程菌株。

3.根据权利要求1－2任一所述方法获得的工程菌。

4.根据权利要求3所述工程菌的应用，其特征在于：将基因工程菌株在甲醇为碳源的培养液中进行发酵，得到含油菌体，经提取分离得到油脂。

5.根据权利要求4所述工程菌的应用，其特征在于：所生产的油脂作为基础原料，用于生物柴油、航空燃料、表面活性剂、油漆、油墨、润滑剂或医药化妆品的生产。