[发明专利]一种人源化抗HER2单克隆抗体

说明书

一种人源化抗HER2单克隆抗体，属于单克隆抗体领域，可与人HER2结合并抑制HER2阳性癌细胞的增殖，具有SEQ ID NO:1～SEQ ID NO:6所示的CDR区序列，或SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8所示的可变区序列，与现有的抗HER2抗体相比具有不同的HER2阳性癌细胞敏感性，并有更好的热稳定性，具有常温下保存时间长、产品保质期长等特点，便于储存和运输；可用于制备治疗HER2阳性癌症的药物，或用于制备HER2免疫检测试剂盒。

技术领域

本发明属于单克隆抗体领域，具体涉及一种人源化抗HER2单克隆抗体。

背景技术

乳腺癌是在女性中发病率高的癌症，每年全世界约有140万人被诊断为乳腺癌，国内每年新发病例约27.3万。大约20-30%的乳腺癌患者存在HER2（Human Epidermal GrowthFactor Receptor 2，人表皮生长因子受体2，也叫ErbB 2或Neu）基因丰富和HER2蛋白过表达的现象。HER2过表达导致MAPK和PI3K/Akt信号转导途径激活、上调。HER2阳性乳腺癌在靶向治疗出现之前曾被认为与下降的无复发生存期和总生存期以及更差的预后相关。正常细胞的细胞膜上HER2受体的表达量大约为2万个，而HER2阳性乳腺癌细胞的HER2受体表达量约为1～2百万个，使得HER2成为一个有吸引力的靶向治疗对象（Ann Transl Med. 2014Dec;2(12):122.）。

HER2是由原癌基因编码的跨膜受体蛋白，属于ErbB家族，该家族有4个质膜结合受体酪氨酸激酶成员，分别是HER1（ErbB1）、HER2（ErbB2）、HER3（ErbB3）、HER4（ErbB4），调控着细胞的生长、生存，以及细胞黏附、迁移、分化和其他细胞应答。该家族的大多数成员可通过EGF（表皮生长因子）、TGFα（转化生长因子α）等配体激活，也可通过同源二聚体化或与家族成员发生异源二聚体化的非配体依赖途径激活。然而HER2至今未发现能与其结合的配体，主要通过二聚体化来激活（Cancer Manag Res. 2016 May 19;8:57-65. doi: 10.2147/CMAR.S104447.）。此外HER2还能通过蛋白酶切除胞外区的方式激活。HER2分子根据剪接形式的不同有6种亚型（isoform），a亚型（isoform a，或isoform 1）前体蛋白由1255个氨基酸构成，分子量185kD，自N端至C端由信号肽（第1-22氨基酸，不包含在成熟蛋白中）、胞外区（第23-652氨基酸）、跨膜区（第635-675氨基酸）、胞内区（第676-1255氨基酸）组成。HER2胞外区是发生同源二聚体化或与家族其他成员发生异源二聚体化的区域，胞内区具有酪氨酸激酶活性，胞外区二聚体化可导致胞内区发生自磷酸化、酪氨酸激酶活性被激活，进而激活MAPK、PI3K/Akt等下游信号转导途径（Breast Care 2015;10:173–178.）。HER2胞外区由大约630个氨基酸组成（不包括信号肽），从N端到C端可分成四个结构域：domain I（约165个氨基酸）、domain II（约145个氨基酸）、domain III（约170个氨基酸）、domain IV（约140个氨基酸）（Mol Cell. 2003 Sep;12(3):541-52.）。

到目前为止，获FDA（美国食品药品监督管理局）批准上市的抗HER2抗体药物有3个：Trastuzumab（曲妥珠单抗，商品名Herceptin，赫赛汀）、Pertuzumab（帕妥珠单抗，商品名Perjeta）和ado-trastuzumab emtansine（T-DM1，商品名Kadcyla），均由Roche公司（下属的Genentech公司）开发。