[发明专利]一种培养CD19CAR-iNKT细胞方法及用途

权利要求书

1.一种基因修饰的iNKT细胞或含该基因修饰的iNKT细胞的药物组合物，其特征在于，所述细胞含有融合蛋白，所述融合蛋白包含依次连接的抗CD19单链抗体、人CD8α铰链区、人CD8跨膜区、人41BB胞内区和人CD3ζ胞内区，

其中所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO: 2第22-128位氨基酸所示，所述抗CD19单链抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第144-263位氨基酸所示，所述人CD8α铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第264-310位氨基酸所示；所述人CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第311-332位氨基酸所示；所述人41BB胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第333-380位氨基酸所示；所述人CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第381-491位氨基酸所示。

2.如权利要求1所述的iNKT细胞或药物组合物，其特征在于，所述融合蛋白在所述抗CD19单链抗体的N端还含有信号肽。

3.如权利要求2所述的iNKT细胞或药物组合物，其特征在于，所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-21位氨基酸所示。

4.一种基因修饰的iNKT细胞或含该基因修饰的iNKT细胞的药物组合物，其特征在于，所述细胞含有多核苷酸，所述多核苷酸的序列含有（1）依次连接的抗CD19单链抗体的编码序列、人CD8α铰链区的编码序列、人CD8跨膜区的编码序列、人41BB胞内区的编码序列和人CD3ζ胞内区的编码序列，和/或（2）（1）所述序列的互补序列；

其中，所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第22-128位氨基酸所示，所述抗CD19单链抗体的重链可变区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第144-263位氨基酸所示，所述人CD8α铰链区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第264-310位氨基酸所示；所述人CD8跨膜区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第311-332位氨基酸所示；所述人41BB胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第333-380位氨基酸所示；所述人CD3ζ胞内区的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第381-491位氨基酸所示。

5.如权利要求4所述的iNKT细胞或药物组合物，其特征在于，所述多核苷酸在抗CD19单链抗体的编码序列前还含有信号肽的编码序列。

6.如权利要求5所述的iNKT细胞或药物组合物，其特征在于，所述信号肽的氨基酸序列如SEQ ID NO:2第1-21位氨基酸所示。

7.如权利要求4所述的iNKT细胞或药物组合物，其特征在于，

所述抗CD19单链抗体的轻链可变区的编码序列如SEQ ID NO:1第64-384位核苷酸序列所示；所述抗CD19单链抗体的重链可变区的编码序列如SEQ ID NO:1第430-789位核苷酸序列所示；所述人CD8α铰链区的编码序列如SEQ ID NO:1第790-930位核苷酸序列所示；所述人CD8跨膜区的编码序列如SEQ ID NO:1第931-996位核苷酸序列所示；所述人41BB胞内区的编码序列如SEQ ID NO:1第997-1140位核苷酸序列所示；所述人CD3ζ胞内区的编码序列如SEQ ID NO:1第1141-1473位核苷酸序列所示。