[发明专利]一种鉴定和筛选高儿茶素指数茶树的功能标记及其应用

权利要求书

1.一种茶树类黄酮3′,5′-羟化酶基因扩增引物，其特征在于该扩增引物的上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物如SEQ ID No.2所示。

2.一种茶树类黄酮3′,5′-羟化酶基因扩增引物在鉴定和筛选具有高儿茶素指数茶树中的应用，其特征在于该扩增引物的上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物如SEQ IDNo.2所示，所述的高儿茶素指数茶树指的是CI值大于2.5的特异茶树材料。

3.一种茶树类黄酮3′,5′-羟化酶基因扩增引物在鉴定和筛选具有高儿茶素指数茶树中的应用方法，其特征在于包括以下步骤：

利用扩增引物对各茶树材料中的F3′5′H基因起始密码子ATG上游837bp至上游686bp的DNA片段进行PCR扩增和琼脂糖凝胶分析，所示扩增引物的上游引物序列如SEQ ID No.1所示，下游引物如SEQ ID No.2所示，如扩增产物显示为152bp的片段则该茶树确定为常规资源，如扩增产物显示为138bp的片段则该茶树确定为高儿茶素指数茶树。

4.如权利要求3所述的应用方法，其特征在于所述的PCR扩增的体系和反应程序为：PCR反应体系：32 µL ddH₂O，2 µL DNA，5 µL 10×PCR Buffer，4 µL 25 mM MgCl₂，5 µL 2 mMdNTP，1µL KOD-Plus-Neo酶，10 µM 的上、下游引物各3 µL；PCR扩增程序为：94℃ 2 min，然后进行以下循环，94℃ 15 sec，56℃ 25 sec，68℃ 5 sec，共 35个循环；最后68℃延伸2min；扩增产物在3%的琼脂糖胶电泳分离。