[发明专利]一种用于微小亚历山大藻的培养基及其培养方法

说明书

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种用于微小亚历山大藻的培养基及其培养方法。培养基具体包括以下摩尔浓度的各组分：硝酸钠为1766μmol/L，磷酸二氢钠为18.15μmol/L，氯化铁为5μmol/L，Na2EDTA为5μmol/L，硫酸铜为0.02μmol/L，钼酸钠为0.015μmol/L，硫酸锌为0.04μmol/L，氯化钴为0.025μmol/L，氯化锰为0.45μmol/L，天然海水。采用该培养基培养的微小亚历山大藻，能够及大地提高产毒量，并且其中的培养方法为连续培养方法，省时省力。

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种用于微小亚历山大藻的培养基及其培养方法。

背景技术

微小亚历山大藻（Alexandrium minutum）隶属原生生物界（Protoctista）、甲藻门（Dinoflagellata）、亚历山大属（Alexandrium），是一种有甲片的海洋浮游甲藻，细胞大小在13-30μm，分布广泛并且与产麻痹性贝类毒素（paralytic shellfish toxins PSTs）赤潮有关。其体内产生的膝沟藻毒素(gonyautoxin)GTX1、GTX2、GTX3、GTX4，经软体动物富集，最终通过食物链传递给贝类、鱼类和人类，可引起人严重的麻痹性贝类毒素中毒（paralyticshellfish poisoning PSP），国内已发生多起因食用含麻痹性贝类毒素的织纹螺而导致死亡的事故。

麻痹性贝类毒素是一类具有神经毒害作用的生物碱，其中毒机理是毒素结合了钠离子通道结构，阻碍了钠离子的流动。中毒后没有解药，唯一的解救方法是人工呼吸和输液。PSTs因其毒性强烈、无色无味且具有麻痹作用，在军事上有应用于生化武器的可能性，在医疗上则作为探索新型麻醉剂的前体物质，而在环境和食品检测方面，国外已有部分PSTs毒素标准品出售，但售价昂贵。

制备膝沟藻毒素需要大量的原材料，通常通过培养产毒微藻来获得。微小亚历山大藻产毒量不仅受到光强、温度、盐度等环境因素影响，还受到氮磷等营养配方、培养方式的影响。现已知微小亚历山大藻通常培养在f/2海水培养基和K海水培养基中，但是它们并非产毒最佳的营养配方，如果用其大规模培养海藻，会造成资源的浪费和成本提高。

发明内容

本发明的目的是为了解决上述存在的微小亚历山大藻所问题，提供一种用于微小亚历山大藻的培养基及其培养方法。

另外，由于亚历山大藻的生长对扰动较为敏感，本案采用半连续的培养方式，培养周期较短，省时省力。是一种非常适合微小亚历山大藻产毒的培养基，其方法是一种高效的培养方法。

这里，公布了一种用于培养微小亚历山大藻的培养基和半连续培养方法，能够显著提高产毒含量。

为了达到上述发明目的，本发明采用以下技术方案：

一种用于微小亚历山大藻的培养基，具体包括以下摩尔浓度的各组分：硝酸钠为1766μmol/L，磷酸二氢钠为18.15μmol/L，氯化铁为5μmol/L，Na₂EDTA为5μmol/L，硫酸铜为0.02μmol/L，钼酸钠为0.015μmol/L，硫酸锌为0.04μmol/L，氯化钴为0.025μmol/L，氯化锰为0.45μmol/L，天然海水。

作为进一步优选，所述培养基还包括硝酸钐0.01μmol/L。

作为进一步优选，该培养基的配置方法具体如下：

（1）天然海水静置，取上清海水经0.22μm滤膜过滤，装在透明培养容器中，121℃高压蒸汽灭菌20分钟；