[发明专利]一种紫薯中绿原酸类化合物标准品的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种紫薯中绿原酸类化合物标准品的制备方法。

背景技术

紫薯为旋花科甘薯属草本植物，一般认为其原产于热带美洲或中美洲，世界上许多热带或亚热带地区都有广泛种植。在一些发展中国家，紫薯已经成为一种主要的粮食作物。就世界范围而言，紫薯已成为小麦、水稻、玉米、马铃薯、大麦和木薯之后排名第七的主创。研究表明，紫薯含有多种功能性成分，如花青素、咖啡酸类化合物、黄酮、多糖、游离氨基酸、有机硒畔和蛋白质等，因此，紫薯具有多种生理保健功能，如抗癌、降血糖、降血压、抗氧化等。

紫薯中的绿原酸类化合物主要为咖啡酰基奎宁酸类化合物，这类化合物生物活性好，是许多中药材(如金银花)和相关药品的主要活性成分，常被用来评价相关药材和药品质量的标准物质。然而，部分该类成分，如异绿原酸B、异绿原酸C和3，4，5-三咖啡酰基奎宁酸在传统药材中的含量较低，且结构不稳定，关于这些化合物标准品制备工艺鲜有报道。已有研究和笔者高效液相色谱分析结果表明，紫薯中这些化合物的含量较高，是大量获得其高纯样品的优质资源哺。但是，研究发现紫薯中的花青素类化合物在多数分离材料上拖尾现象非常严重，直接影响绿原酸类化合物最终产品的色泽和纯度。有文献报道采用高速逆流色谱技术从紫薯中分离得到绿原酸和异绿原酸A，但是这两个化合物在山银花等药材中含量同样较高，市场价值不大，且异绿原酸A的纯度尚未达到标准品的要求，其对最终产品的色泽也没有明确说明。

发明内容

本发明提出一种紫薯中绿原酸类化合物标准品的制备方法。

一种紫薯中绿原酸类化合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将紫薯5kg切薄片，以沸水提取3次(20L/次)，每次提取时间10min，提取液过滤，滤液加浓盐酸至pH3；

（2）将所述溶液通过D72大孔树脂，纯水洗脱至洗脱液无色，换用甲醇洗脱至树脂无色，甲醇洗脱液浓缩至干，得红色洗脱物43g；

（3）取20g该洗脱物溶于50mL0.5％醋酸水溶液进行Sephadex LH．20柱层析，先用40％甲醇，所述洗脱，色谱柱中呈现出3条色带，均为紫薯花色苷类化合物，依次接收得组分1～3，再以80％甲醇洗脱得紫薯绿原酸类化合物；

（4）取2g紫薯绿原酸类化合物溶于10mL备液中，过滤，采用制备液相条件的方法进行制备，根据峰形收集5～30min流出液，60℃减压浓缩干燥，得化合物。

优选地，所述甲醇含0.5％醋酸溶液。

优选地，所述步骤（4）收集5～30min流出液，干燥温度为60℃。

本发明所述方法制备的紫薯中绿原酸类化合物标准品。色泽较好、纯度大操作简单、成本低、市场价值高可用于规模化生产。

具体实施方式

实施例1。

本发明提出一种紫薯中绿原酸类化合物标准品的制备方法。

一种紫薯中绿原酸类化合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将紫薯5kg切薄片，以沸水提取3次(20L/次)，每次提取时间10min，提取液过滤，滤液加浓盐酸至pH3；

（2）将所述溶液通过D72大孔树脂，纯水洗脱至洗脱液无色，换用甲醇洗脱至树脂无色，甲醇洗脱液浓缩至干，得红色洗脱物43g；

（3）取20g该洗脱物溶于50mL0.5％醋酸水溶液进行Sephadex LH．20柱层析，先用40％甲醇，所述洗脱，色谱柱中呈现出3条色带，均为紫薯花色苷类化合物，依次接收得组分1～3，再以80％甲醇洗脱得紫薯绿原酸类化合物；

（4）取2g紫薯绿原酸类化合物溶于10mL备液中，过滤，采用制备液相条件的方法进行制备，根据峰形收集5～30min流出液，60℃减压浓缩干燥，得化合物。

（5）所述甲醇含0.5％醋酸溶液。

实施例2。

本发明提出一种紫薯中绿原酸类化合物标准品的制备方法。

一种紫薯中绿原酸类化合物的制备方法，包括以下步骤：

（1）将紫薯5kg切薄片，以沸水提取3次(20L/次)，每次提取时间10min，提取液过滤，滤液加浓盐酸至pH3；

（2）将所述溶液通过D72大孔树脂，纯水洗脱至洗脱液无色，换用甲醇洗脱至树脂无色，甲醇洗脱液浓缩至干，得红色洗脱物43g；

（3）取20g该洗脱物溶于50mL0.5％醋酸水溶液进行Sephadex LH．20柱层析，先用40％甲醇，所述洗脱，色谱柱中呈现出3条色带，均为紫薯花色苷类化合物，依次接收得组分1～3，再以80％甲醇洗脱得紫薯绿原酸类化合物；