[发明专利]一种与抗血小板药物氯吡格雷治疗缺血性脑卒中相关的SNP标志物及其应用

说明书

本发明公开了一种与抗血小板药物氯吡格雷治疗缺血性脑卒中相关的SNP标志物及其应用，以及检测该标志物的特异性扩增引物和特异性延伸引物。所述SNP标志物为rs6686001、rs2302429、rs2242480、rs4244285和rs2046934的组合。各标志物及其特异性扩增引物和特异性延伸引物的序列依次分别如SEQ ID NO.1～20所示。本发明公开的SNP标志物组合能够很好的区分氯吡格雷抵抗和氯吡格雷有效的缺血性脑卒中人群，所述SNP标志物及其扩增引物以及相关的试剂盒，可用于采用抗血小板药物氯吡格雷治疗缺血性脑卒中患者的临床用药指导，预防药物抵抗，增强治疗效果。

技术领域

本发明属于基因工程及脑血管医学技术领域。更具体地，涉及一种与抗血小板药物氯吡格雷治疗缺血性脑卒中相关的SNP标志物及其应用。

背景技术

缺血性脑卒中，又被称为脑梗塞或脑梗死（中医则称之为中风），是指由于脑部血液供应障碍，缺血、缺氧引起的局限性脑组织的缺血性坏死或脑软化。在我国，随着社会发展及居民生活方式和饮食习惯的不断改变，脑卒中已经成为目前我国人口死亡原因第二位的疾病，严重威胁居民健康。

目前根据循证医学的证据，在积极干预高血压、糖尿病、高胆固醇血病、脑血管狭隘等缺血性脑卒中的危险因素的同时，抗血小板聚集治疗是有效防治脑梗死的基石，可显著降低中风的复发率和死亡率。而氯吡格雷是继阿司匹林之后一个重要的噻吩并吡啶类抗血小板药物，对动脉粥样硬化相关心脑血管疾病（如心肌梗塞、中风或血管性死亡等）具有良好的防治作用。氯吡格雷作为前体药物，必须通过CPY450酶代谢，生成能抑制血小板聚集的活性代谢物。氯吡格雷的活性代谢产物选择性的抑制二磷酸腺苷（ADP）与其血小板P2Y12受体的结合及继发的ADP介导的糖蛋白GPIIb/IIIa复合物的活化，因此抑制血小板聚集。通过阻断释放的ADP诱导的血小板活化聚集途径也可抑制除ADP以外的其他激动剂诱导的血小板聚集，达到良好的治疗效果。

尽管服用氯吡格雷可以使大部分缺血性脑卒中患者获得良好收益，但是近年来越多越多的研究发现，不同患者对其具有不同的药物反应性。其中，据报道，约有4～30%患者服用氯吡格雷后未能达到充分抑制血小板聚集的作用，却引发一系列不良后果，这种现象被称为氯吡格雷抵抗。如何克服氯吡格雷抵抗成为广大临床医生和研究者热切关注的问题。众多遗传因素，如代谢酶、转运体、核受体基因多态性被认为与其具有紧密关联。单核苷酸多态性（SNP）被认为赋予了个体不同的表型性状，以及对于环境暴露、药物治疗等因素的不同反应性。因此如果患者在一些重要的相关调控基因上具有不同的SNP型，则会导致不同患者对氯吡格雷的治疗具有不同的反应性，因此相关SNP可能是氯吡格雷抵抗的关键因素。通过筛查氯吡格雷作用的相关的SNP谱，可以用来筛选氯吡格雷防治的受益人群。如果能够通过相关的SNP组合确定哪些缺血性脑卒中患者适合服用氯吡格雷，哪些患者不适合氯吡格雷治疗，就能够在发病初期确定最佳的用药方案，减少药物滥用，达到良好的治疗效果。然而，目前临床上仍然缺少相关SNP用于指导合理用药，是临床上急需解决的问题。

发明内容

本发明要解决的技术问题是克服上述现有技术的缺陷和不足，提供一种与抗血小板药氯吡格雷防治缺血性脑卒中相关的SNP位点，可用于采用抗血小板药物氯吡格雷治疗缺血性脑卒中患者的临床用药指导，预防药物抵抗，增强治疗效果。具体是通过分离和研究服用抗血小板药物氯吡格雷的缺血性脑卒中患者的外周血DNA中的SNP，寻找与氯吡格雷反应性差异高度相关的位点，并研制出可临床或人群应用的氯吡格雷防治缺血性脑卒中的相关试剂盒，为缺血性脑卒中的防治药物选择提供指导。

本发明的目的是提供一种与抗血小板药物氯吡格雷治疗缺血性脑卒中相关的SNP标志物。

本发明另一目的是提供上述标志物的特异性扩增引物和特异性延伸引物。

本发明的再一目的是提供上述标志物及其特异性扩增引物与特异性延伸引物在制备抗血小板药物氯吡格雷防治缺血性脑卒中的辅助诊断试剂盒中的应用。