[发明专利]一种香豆素类的苯硫酚荧光探针及其制备方法

说明书

本发明公开了一种用于特异性识别苯硫酚的荧光探针及其制备方法。该探针由2,3,6,7‑四氢‑10‑羟基‑1H,5H‑喹嗪并(9,1‑GH)香豆素和2,4‑二硝基氟苯在有机溶剂中经碱催化得到的。在乙腈/PBS缓冲体系中，该探针选择性地与苯硫酚作用，释放出强荧光物质2,3,6,7‑四氢‑10‑羟基‑1H,5H‑喹嗪并(9,1‑GH)香豆素，使反应体系在波长为519nm处有强荧光信号。实验结果表明，该探针能够特异性识别苯硫酚，并且具有检测限低（仅为36nmol/L）、Stokes位移大（128nm）等特点，运用其对苯硫酚的荧光增强响应可以实现苯硫酚的定性定量检测。该探针可经化学合成获得，合成工艺简单易行，并且检测方法操作简单、灵敏度高、选择性好，使得该类探针在生物领域具有实际的应用价值。

技术领域

本发明涉及一种基于香豆素类结构的苯硫酚荧光探针的制备及其对苯硫酚的选择性荧光检测，属于有机小分子荧光探针领域。

背景技术

苯硫酚属于硫醇类化合物，无色液体，具有特殊臭味，是一种重要的化工原料。但是苯硫酚具有很大的毒性，对鱼类半数致死量为0.01mmol/L～0.4 mmol/L。人体接触苯硫酚液体或者气体都将导致严重的中枢神经系统损害以及其他相关系统的伤害，包括呼吸急促、肌肉虚弱、恶心呕吐、昏迷甚至死亡。苯硫酚遇明火、高热或与氧化剂接触，有引起燃烧爆炸的危险。考虑到苯硫酚对环境及人体健康的危害，发展简单有效的方法检测苯硫酚具有重要意义。

发明内容

一种基于2,3,6,7-四氢-10-羟基-1H,5H-喹嗪并(9,1-GH)香豆素结构的苯硫酚荧光探针，其结构如下：

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该探针的制备方法如下：

以2,3,6,7-四氢-10-羟基-1H,5H-喹嗪并(9,1-GH)香豆素、2,4-二硝基氟苯为原料，在有机溶剂中经碱催化合成该探针。其中2,3,6,7-四氢-10-羟基-1H,5H-喹嗪并(9,1-GH)香豆素：2,4-二硝基氟苯：碱摩尔比为1:1～1.5:2～3进行反应，碱选用碳酸钾或三乙胺；有机溶剂为二氯甲烷、乙腈或四氢呋喃；反应温度为室温；反应时间6～12小时。反应方程式：

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本发明的苯硫酚荧光探针具有以下显著优点：（1）具有新颖的结构；（2）可以在缓冲体系中特异性地检测苯硫酚；(3)检测限低(仅为36nmol/L)、Stokes位移较大（128nm）；（4）与苯硫酚反应表现为荧光增强，可以对苯硫酚进行定性定量检测；（5）该制备方法原料易得，产品易于分离、纯化。

附图说明

图1为实施例1制得的荧光探针的乙腈/PBS缓冲液（10mmol/L,pH=7.4）溶液(乙腈与PBS缓冲液体积比为3:7, 探针浓度为10µmol/L)及探针溶液与各种分析物混合后的荧光发射图谱（对甲氧基苯硫酚、苯硫酚、对氨基苯硫酚浓度为200µmol/L；其他分析物浓度为500µmol/L，包括氟化钾、氯化钠、溴化钾、碘化钾、碳酸钠、醋酸钠、硝酸钠、硫化钠、亚硫酸钠、硫酸钠、硫氰酸钾、硫代硫酸钠、连二亚硫酸钠、亚硝酸钠、双氧水、巯基乙酸、乙硫醇、丙氨酸、甘氨酸、半胱氨酸、谷胱甘肽、高半胱氨酸），纵坐标表示荧光强度，横坐标表示波长。激发波长为395nm。