[发明专利]一种脐带保存液及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及医学领域，具体的说是涉及一种脐带保存液及其应用。

背景技术

脐带是胎儿时期连接母体与胎儿的索状结构，其外被羊膜，内含2条脐动脉、1条脐静脉，在动静脉之间含有特殊的胚胎粘液样结缔组织-华尔通氏胶(Whartonps Jelly)，从华尔通氏胶分离得到的基质细胞即为人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)。

1991年McElreavery首次从人脐带华通氏胶分离培养出一种具有多项分化潜能的成纤维样细胞，即人脐带间充质干细胞(human umbilical cordmesenchymal stem cells，hUC-MSCs)。hUC-MSCs比来源于骨髓、脂肪以及其他组织的MSCs更具有优势，首先，脐带来源不受伦理争议，并且成本较低；其次，hUC-MSCs不会引起畸胎瘤，并且具有抑癌性，由于hUC-MSCs还具有低免疫原性、免疫调节、基质支持、旁分泌、迁移和基因稳定性，故具有良好的临床治疗潜能。

脐带在采集、运输、分离的过程中都需要处于无菌状态，由于孕妇分娩时间的不确定性，脐带在采集后不能完全保证马上用于原代分离，大多数情况下都需要保存一段时间，脐带保存液的功效决定了脐带原代分离的成功率，传统采用将脐带组织浸没在含多种组分的PBS中，例如专利CN101868536A公开了一种保存液，配方为186μg/mL CaCl₂·2H₂O，400μg/mL KCl，60μg/mL KH₂PO₄，200μg/mLMgSO₄·7H₂O，8000μg/mL NaCl，350μg/mL NaHCO₃，90μg/mL NaH₂PO₄·7H₂O，2000μg/mL葡萄糖、及青霉素和链霉素的1％等摩尔混合物。但是，这种PBS保存液配制较为复杂和繁琐，自行配置工作量较大，而购买成品，因为其价格昂贵导致成本增加。

针对上述问题，现有专利CN102550543A公开了一种成分简单的脐带保存液，由生理盐水、青霉素和链霉素组成。虽然在该保存液制备上比较简单，而且成本也较低，但是随着青霉素和链霉素的大面积使用，导致一些耐药性的细菌产生，使得这种双抗的保存液在保存脐带的效果方面不尽如人意。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于一种脐带保存液及其应用，使得所述脐带保存液组成简单，同时保证脐带较好的保存效果。

为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种脐带保存液，包括生理盐水、甲砜霉素和甲硝唑。

针对现有的含有双抗的脐带保存制剂保存效果不佳的问题，本发明从脐带的保存效果角度考虑调整保存液中的成分，选择甲砜霉素、甲硝唑和生理盐水组成全新的保存液对脐带进行保存，达到了较高的保存效果。

其中，作为优选，甲砜霉素浓度为5-20mg/ml，更优选为6mg/ml；甲硝唑浓度优选为5-20mg/ml。在本发明具体实施方式中，上述两个组分浓度可选择如下：

(1)甲砜霉素浓度为10mg/ml，甲硝唑浓度为15mg/ml；

(2)甲砜霉素浓度为20mg/ml，甲硝唑浓度为10mg/ml；

(3)甲砜霉素浓度为15mg/ml，甲硝唑浓度为8mg/ml；

(4)甲砜霉素浓度为8mg/ml，甲硝唑浓度为18mg/ml；

(5)甲砜霉素浓度为6mg/ml，甲硝唑浓度为5mg/ml；

本发明保存液和专利CN102550543A实施例1保存液进行保存效果的对比试验，结果显示，经过本发明保存液保存24h后，脐带污染率在5％以下，而专利CN102550543A实施例1保存液在保存脐带24h后，污染率为10％。同时，本发明还将经过保存液保存过的脐带进行hUC-MSCs的分离，在经过传代第3代时绘制细胞生长曲线，结果表明，本发明保存液和现有专利的保存液均不影响hUC-MSCs的增殖能力。

由此，本发明随之提供了本发明所述脐带保存液在保存脐带和/或制备保存脐带的产品中的应用。

同时，本发明提供了一种保存脐带的方法，将脐带分离后置于本发明所述脐带保存液中，于4℃下保存。