[发明专利]一种用于培养心肌祖细胞的试剂盒有效

专利信息
申请号: 201611082288.7 申请日: 2016-11-30
公开(公告)号: CN106754671B 公开(公告)日: 2020-02-07
发明(设计)人: 张晓南;吴芳春;陈虎;张斌;侍晓云 申请(专利权)人: 张晓南
主分类号: C12N5/0775 分类号: C12N5/0775;A01N1/02
代理公司: 11419 北京爱普纳杰专利代理事务所(特殊普通合伙) 代理人: 王玉松
地址: 100085 北京市*** 国省代码: 北京;11
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摘要:
搜索关键词: 祖细胞 心肌 生长因子 培养液 试剂盒 试剂瓶 扩增 冷冻保存 实验研究 细胞种子 医学治疗 营养平衡 存活率 冻存液 清洗液 消化液 冻存 复活 盛装 分化
【权利要求书】:

1.一种用于培养心肌祖细胞的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒内设有若干试剂瓶,若干所述试剂瓶内分别盛装有培养液I、培养液II、生长因子I、生长因子II、生长因子III、生长因子IV、消化液、清洗液、冻存液和细胞种子,所述冻存液是将DMEM/F12干粉培养基、人血白蛋白、果聚糖、大车前苷、苦杏仁甙用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述DMEM/F12干粉培养基30-50g、所述人血白蛋白10-20g、所述果聚糖1-3g、所述大车前苷0.2-0.5g、所述苦杏仁甙0.05-0.08g;

所述培养液I为DMEM/F12培养基溶液,所述DMEM/F12培养基溶液由DMEM/F12干粉培养基用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述DMEM/F12干粉培养基20-40g;

所述培养液II为H-DMEM培养基溶液,所述H-DMEM培养基溶液由H-DMEM干粉培养基用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述H-DMEM干粉培养基20-40g;

所述生长因子I为bFGF溶液,所述bFGF溶液由bFGF冻干粉用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述bFGF冻干粉0.1-0.2mg;

所述生长因子II为EGF溶液,所述EGF溶液由EGF冻干粉用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述EGF冻干粉0.1-0.2mg;

所述生长因子III为LIF溶液,所述LIF溶液由LIF冻干粉用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述LIF冻干粉0.1-0.2mg;

所述生长因子IV为VEGF溶液,所述VEGF溶液由VEGF冻干粉用注射用水溶解而成,每L所述注射用水溶解所述VEGF冻干粉0.1-0.2mg;

所述消化液为含1%胰酶的PBS缓冲液;

所述清洗液为PBS缓冲液;

所述PBS缓冲液均为含0.05%吐温-20,pH值为7.4的磷酸盐缓冲液;

所述细胞种子为心肌祖细胞原代细胞。

2.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述冻存液中还含有海藻酸丙二醇酯、甘氨酸钠和葡萄糖酸内酯,每L所述注射用水溶解所述海藻酸丙二醇酯0.6-1.3g、所述甘氨酸钠0.4-0.8g、所述葡萄糖酸内酯0.1-0.3g。

3.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述冻存液中还含有二硫代甘醇酸和甲酸钠,每L所述注射用水溶解所述二硫代甘醇酸0.3-0.5g、所述甲酸钠0.08-0.2g。

4.根据权利要求1所述的试剂盒,其特征在于,所述试剂瓶内还盛装有培养基添加剂,所述培养基添加剂包括如下重量份数的各成分:

5.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述培养基添加剂中还包括如下重量份数的各成分:

葛根素 0.5-1

维生素E 0.2-0.6。

6.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述培养基添加剂中还包括如下重量份数的各成分:

酒石酸钾钠 0.8-1

聚乙烯醇 0.1-0.3。

7.根据权利要求4所述的试剂盒,其特征在于,所述培养基添加剂中还包括如下重量份数的各成分:

谷胱甘肽 0.3-0.7

对羟基苯甲酸甲酯 0.1-0.2。

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