[发明专利]一种布鲁氏菌诊断标识作用的基因表达产物BLSJ-3及其制备方法有效
申请号: | 201611078420.7 | 申请日: | 2016-11-30 |
公开(公告)号: | CN106749563B | 公开(公告)日: | 2020-05-19 |
发明(设计)人: | 朱良全;丁家波;张磊;蒋卉;彭小薇;冯宇;范学政 | 申请(专利权)人: | 中国兽医药品监察所 |
主分类号: | C07K14/23 | 分类号: | C07K14/23;G01N33/569 |
代理公司: | 北京君智知识产权代理事务所(普通合伙) 11305 | 代理人: | 郑明 |
地址: | 100081 *** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 布鲁氏菌 诊断 标识 作用 基因 表达 产物 blsj 及其 制备 方法 | ||
1.一种布鲁氏菌诊断标识作用基因的表达产物BLSJ-3的应用,其特征在于将该诊断标识作用基因的表达产物制备为区分动物布鲁氏菌疫苗免疫和自然感染血清检测抗原;
所述诊断标识作用基因的表达产物是由布鲁氏菌S2株基因编号为490819668的基因,表达为“假想蛋白/31kDa外膜免疫源性蛋白(hypothetical protein/31kDa outer-membrane immunogenic protein)”;该基因长度:723bp;其表达产物的蛋白分子量25.3kDa;其基因序列为序列1。
2.如权利要求1所述的一种布鲁氏菌诊断标识作用基因的表达产物BLSJ-3的应用,其特征在于其中表达产物BLSJ-3的制备方法为:(1)基因筛选:从布鲁氏菌S2株基因组中,通过免疫蛋白组学方法,筛选鉴定出上述权利1的基因;(2)基因表达:通过设计序列2和序列3的引物,经过常规PCR克隆扩增,将其置于pGEX6p-1载体中诱导表达;(3)表达产物纯化:通过谷胱甘肽S转移酶(GST)亲和层析柱与谷胱甘肽梯度洗脱法纯化表达产物,获得所需抗原,被命名为BLSJ-3。
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