[发明专利]一种葛仙米蛋白质的提取方法

说明书

本发明涉及一种葛仙米蛋白质的提取方法，包括用纯水提取葛仙米藻胆蛋白，依次将滤渣用氢氧化钠溶液提取碱溶蛋白、用乙醇溶液提取醇溶蛋白、用氯化钠溶液提取盐溶蛋白，将所得葛仙米藻胆蛋白粗提液、碱溶蛋白粗提液、醇溶蛋白粗提液、盐溶蛋白粗提液混合，用陶瓷膜超滤除杂，用有机膜超滤浓缩，冷冻干燥，即得葛仙米蛋白质。本发明相比现有的反复冻融法大大简化了操作难度，克服了苛刻的条件，同时提取率远优于现有技术，可以将葛仙米中约70％的蛋白质提取出来。相较于现有技术单一提取藻红蛋白、藻蓝蛋白或者成分较多藻胆蛋白，本发明方法提取的是全面的葛仙米蛋白质可以作为一种全面的营养素添加到工业食品、药品中，有着广阔的应用前景。

技术领域

本发明涉及一种葛仙米蛋白质的提取方法。

背景技术

葛仙米(Nostoc sphaeroids Kutzing)，学名拟球状念珠藻，属蓝藻门(Nostocaceae)念珠藻属(Nostoc.)，与发菜同属，古称天仙米、天仙菜，又名水木耳、田木耳、地木耳(Nostoc commune vauch)，是我国传统出口的珍贵药食两用固氮蓝藻。它是一种多细胞的丝状植物，其细胞结构简单、个体由圆球形细胞组成不分枝的单列丝状体，丝状体呈念珠状，群体呈胶质状、球状或其他不规则形状，蓝绿色或黄褐色，肉眼可见，具有固氮能力。《本草纲目》、《药性考》、《全国中草药汇编》等称葛仙米的功效为明目益气、令人有子、解热清隔、利肠胃、痰火能疗、久食延年、消除疲劳、收敛、治夜盲症、烫火伤等功效。

葛仙米蛋白质含量丰富，可分为两大类，简单蛋白和复杂蛋白。简单蛋白主要组成为清蛋白(主要为藻胆蛋白)、盐溶蛋白、醇溶蛋白和碱溶蛋白，复杂蛋白为复合蛋白。其中，简单蛋白占葛仙米蛋白质50％以上。藻胆蛋白是广泛存在于与红藻、蓝绿藻和隐藻的藻胆体(Phycobilisomes，PBS)中的捕光色素蛋白，包括藻蓝蛋白(Phycocyanin，PC)、藻红蛋白(Phycoerythrim，PE)、藻红蓝蛋白(Phycoerythrocyanin，PEC)和别藻胆蛋白(Allphycocyanin，APC)四类。研究表明，葛仙米蛋白质、多糖及氨基酸的含量极高，且组成合理，配比均衡，必须氨基酸种类多达16种以上。其中，蛋白质含量为30.8g/100g，氨基酸总含量为31.06g/100g，甚至超过FAO的标准。葛仙米蛋白包含种类齐全，含量丰富，优于其他藻类。因此，葛仙米是很好的蛋白质提取源。

目前，葛仙米蛋白质的提取主要限于藻胆蛋白的提取，而对于葛仙米总蛋白的提取鲜有报道，藻胆蛋白的提取方法主要有反复冻融法、化学试剂处理法、溶胀法、超声波法、组织捣碎法，这些方法虽可以提取出葛仙米藻胆蛋白，但是或是方法复杂、条件苛刻，需要-20℃条件下反复冷冻，消耗大量的人力物力财力；或是提取得率低，最高仅为7％；或是引入了难以除去的化学试剂，难以保证产品的纯度。另外，多数文献中均是对藻胆蛋白或其单一成分进行提取分离，如藻红蛋白、藻蓝蛋白的提取，并没有考虑到富含多种成分的葛仙米蛋白质正是一种很好的营养佳品，有着广阔的开发前景。因此，有必要开发一种高效提取葛仙米多种蛋白质的方法应用于工业化生产及应用。

发明内容

本发明的目的是提供一种高效提取葛仙米蛋白质的方法。

为实现上述目的，本发明提供一种葛仙米蛋白质的提取方法，包括以下步骤：

1)将干燥的葛仙米粉碎至10～200目，加入葛仙米粉50～70倍重量的水，提取3次，每次提取4～8h，每隔1h用400W～900W的超声波超声处理10～30min；离心，过滤，得到葛仙米藻胆蛋白粗提取液；滤渣备用；

2)将步骤1)所得葛仙米滤渣加入60～90倍重量的氢氧化钠溶液，所述氢氧化钠溶液的浓度为0.1mol/L～0.3mol/L，提取3次，每次提取3～7h，每隔1h用400W～900W的超声波超声10～30min，离心，过滤，得到葛仙米碱溶蛋白粗提取液；滤渣备用；