[发明专利]一种促进微生物转化生产1,3-丙二醇的方法在审
| 申请号: | 201611072031.3 | 申请日: | 2016-11-29 |
| 公开(公告)号: | CN108118072A | 公开(公告)日: | 2018-06-05 |
| 发明(设计)人: | 张霖;樊亚超;王鹏翔;廖莎;李晓姝 | 申请(专利权)人: | 中国石油化工股份有限公司;中国石油化工股份有限公司抚顺石油化工研究院 |
| 主分类号: | C12P7/18 | 分类号: | C12P7/18;C12R1/22;C12R1/01 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 100728 北*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 按比例混合 氢氧化钾 丙二醇 菌种活化液 微生物转化 种子培养基 调控 种子液 微氧 氨水 菌种扩大培养 发酵培养基 发酵培养 发酵体系 甘油转化 菌体细胞 菌种保藏 菌种活化 离子通道 微氧发酵 厌氧发酵 有效促进 最终产物 甘油 渗透压 底物 发酵 生产 | ||
1.一种促进微生物转化生产1,3-丙二醇的方法,其特征在于包括如下内容:
(1)菌种活化:将菌种保藏液与种子培养基按比例混合后进行微氧培养,采用氢氧化钾调控pH为6~8,培养10h~16h得到菌种活化液;
(2)菌种扩大培养:将菌种活化液与种子培养基按比例混合后进行微氧培养,采用氢氧化钾调控pH为6~8,培养10h~16h得到种子液;
(3)发酵培养:以甘油为底物,将种子液和发酵培养基按比例混合,首先进行微氧发酵,发酵时间控制为6h~12h,发酵过程中采用氢氧化钾调控pH为6~8;然后进行厌氧发酵,发酵过程中采用氨水调控pH为6~8。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述氢氧化钾的质量浓度为25%~40%,氨水的质量浓度为2%~5%。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(1)菌种保藏液与种子培养基的体积比为1:50~1:100,培养温度为30~40℃,搅拌速度为50~200rpm。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(2)菌种活化液与种子培养基的体积比为1:10~1:20,培养温度为30~40℃,搅拌速度为50~200rpm。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述种子培养基的组成以g/L计为:甘油40,NH4Cl 2.14,KCl 0.2,NaH2PO4·H2O 1.1,Na2SO4 0.23,MgCl2·6H2O 0.2,柠檬酸 0.34,酵母膏 1,Vc 0.1。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于:在种子培养基中加入营养液,营养液的组成以每L计为:FeCl3·6H2O 5.4g,Na2MoO4·2H2O 0.005g,ZnCl2·6H2O 0.68g,MnCl2·4H2O0.17g,H3BO3 0.06g,CoCl2·6H2O 0.47g,CuSO4·5H2O 0.688g,37%HCl 1mL。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述菌种活化过程与菌种扩大培养过程采用微氧培养,微氧培养采用通入空气的形式,空气通入量为0~0.1vvm。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)种子液与发酵培养基的体积比为1:5~1:10,培养温度为30~40℃,搅拌速度为200~500rpm。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:步骤(3)微氧发酵采用通入空气的形式,空气通入量为0~0.1vvm;厌氧发酵采用通入氮气的形式,氮气通入量为0.1~0.6vvm。
10.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:所述发酵培养基组成以g/L计为:甘油40,NH4Cl 2.67,KCl 0.2,NaH2PO4·H2O 1.38,Na2SO4 0.28,MgCl2·6H2O 0.26,柠檬酸0.42,酵母膏 2,Vc 0.1。
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