[发明专利]一种耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌株及其应用在审
| 申请号： | 201611071966.X | 申请日： | 2016-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN108118006A | 公开（公告）日： | 2018-06-05 |
| 发明（设计）人： | 吕红;周峻岗;余垚 | 申请（专利权）人： | 复旦大学 |
| 主分类号： | C12N1/19 | 分类号： | C12N1/19;C12N9/42;C12R1/645 |
| 代理公司： | 上海元一成知识产权代理事务所(普通合伙) 31268 | 代理人： | 吴桂琴 |
| 地址： | 200433 *** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 耐温 木聚糖酶 马克斯克鲁维酵母 工程菌株 制备 酵母菌 应用 分泌表达载体 木聚糖酶基因 木聚糖酶酶活 生物工程领域 发酵罐发酵 发酵周期 饲料添加 产酶量 工程菌 构建 菌株 克隆 转化 | ||
1.一种重组耐温木聚糖酶马克斯克鲁维酵母工程菌株，其特征在于，由重组载体转化马克斯克鲁维酵母营养缺陷型菌株FIM-ura3Δ所构建，其中，所述重组载体通过将编码耐温木聚糖酶的核苷酸插入到马克斯克鲁维酵母表达载体所构建，其中，所述马克斯克鲁维酵母表达载体包括信号肽序列、马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子基因序列、马克斯克鲁维酵母菊粉酶终止子基因序列；
所述耐温木聚糖酶氨基酸序列包括SEQ ID No.1核苷酸序列(CN200810200060)；
以及，所述耐温木聚糖酶氨基酸序列包括SEQ ID No.2氨基酸序列(CN200810200060)。
2.根据权利要求1所述的重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌株，其特征在于，该重组工程菌株包括马克斯克鲁维酵母自主复制序列、马克斯克鲁维酵母菊粉酶启动子基因序列、信号肽序列、编码耐温木聚糖酶的基因序列、马克斯克鲁维酵母菊粉酶终止子基因序列、营养缺陷筛选标记基因序列。
3.根据权利要求1所述的重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌株，其特征在于，该重组工程菌株不含有抗性基因序列，不含有大肠杆菌序列，其中大肠杆菌序列可以是大肠杆菌起始复制序列。
4.根据权利要求1所述的重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌株，其特征在于，所述的信号肽序列是菊粉酶信号肽序列，或α-信号肽序列。
5.一种耐温木聚糖酶的制备方法，其特征在于，其包括步骤：权利要求1所述重组马克斯克鲁维酵母重组工程菌株发酵培养，发酵时间是48-96小时，发酵温度是25-35度，收集发酵上清液。
6.根据权利要求5所述的制备方法制得的耐温木聚糖酶在用于食品、饲料添加、化工、纺织工业生产中的用途。
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