[发明专利]可从机体组织分离的多能干细胞

说明书

本发明的目的是提供从机体组织直接获得多能干细胞的方法及由此得到的多能干细胞。本发明涉及可从机体组织分离的SSEA‑3(+)多能干细胞。

本申请为分案申请，原申请的申请日为2010年7月15日，申请号为201080041908.7，发明名称为“可从机体组织分离的多能干细胞”。

发明背景

发明领域

本发明涉及机体组织来源的多能干细胞。

背景技术

涡虫和蝾螈即使在其身体被切割后也可再生出完整的身体。这种高再生能力有赖于间充质组织中存在的多能干细胞的存在情况。然而，在高级生物(例如人)的情况下，组织再生能力远低于这些动物的再生能力。哺乳动物胚泡中的内细胞团(或ICM：内细胞群)被公认为是能够分化成外胚层、中胚层和内胚层细胞谱系的细胞的多能干细胞集合体。然而，这种多能性随着发育进行而受到限制，随后进行特化性细胞分化，产生各种组织类型。

近年来，可促进组织再生的成体干细胞或组织干细胞引起了关注。然而，尚不清楚多能干细胞是否像在涡虫或蝾螈的情况一样也存在于成熟哺乳动物机体中。

据报道，具有分化成骨、软骨、脂肪细胞、神经元细胞、骨骼肌等的能力的骨髓基质细胞(MSC)部分为从成体获得的具有分化潜能的细胞(参见非专利文献1和2)。然而，骨髓基质细胞(MSC)由各种类型的细胞群组成。MSC群的分化潜能是变化的，但尚未清楚了解其主体。此外，其需要用特定化合物刺激、基因转移等以分化成特定细胞。准确地讲，需要构建用于诱导分化的系统。

此外，据报道，iPS细胞(诱导多能干细胞)(参见专利文献1、专利文献2、非专利文献3等)为成体来源的多能干细胞。然而，iPS细胞的建立需要使用特殊物质进行诱导操作，例如将特定基因导入作为间充质细胞群的皮肤成纤维细胞部分(dermal fibroblast)或将特定化合物导入体细胞。

专利文献1日本专利号4183742

专利文献2日本专利公布(Kokai)号2008-307007A

非专利文献1M.DEZAWA等，The Journal of Clinical Investigation，113，12，第1701-1710页，(2004)

非专利文献2M.DEZAWA等，SCIENCE，2005年7月8日，309，第314-317页，(2005)

非专利文献3Okita K.等SCIENCE，2008年11月7日，322(5903)，第949-953页

发明概述

本发明的目的是提供从机体组织直接获得多能干细胞的方法，以及提供通过所述方法获得的多能干细胞。

本发明人发现在涉及骨髓基质细胞(MSC：bone marrow stromal cell)部分的研究过程中，以极低频率由未处理的(naive)人MSC细胞形成特有的细胞团。最初细胞团的外观酷似ES细胞的外观。然而，与ES细胞不同，细胞团不进行无限生长。当它们在一定时间内达到某一大小便停止生长，然后形成含有毛细胞和色素细胞等各种细胞的非均质群。另外，对这些细胞团进行免疫细胞化学分析，分别从细胞团中检出对外胚层、内胚层和中胚层标记呈阳性的不同细胞。本发明人从该结果中考虑在通常保持和培养的未处理(naive)人MSC细胞部分中相当于多能性/多能细胞的细胞存在的可能性。因此，本发明人对该问题进行了进一步的深入研究。