[发明专利]一种从黑蒜中提取蒜氨酸的方法

说明书

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及一种从黑蒜中提取蒜氨酸的方法。

背景技术

黑蒜又名黑大蒜，发酵黑蒜，是用新鲜的生蒜，带皮放在发酵容器内发酵制成的食品。与生蒜相比黑蒜的营养保健功能和药用价值有了较大的提高，比如在抗氧化性、防癌抗癌、杀菌消炎、抗衰老、调节血糖水平、保肝护肝、增强免疫功能、治疗高血压和心脑血管疾病等方面。近几年来关于黑蒜药用价值的研究较多，尤其是黑蒜的防癌、抗癌功能更加受到科研工作者的重视。研究表明黑蒜水提液对肝癌肿瘤有明显的抑制生长作用，抑瘤有效率可大于 40%；采用黑蒜水提液联合放射治疗肝癌，降低了肿瘤标志物的表达，提高了患者的生存质量；黑蒜提取液联合放疗可明显抑制荷H22小鼠移植瘤的生长，其作用机制可能与其下调抗凋亡 Bcl－2蛋白及上调促凋亡Bax蛋白的表达和提高机体抗氧化能力有关。

蒜氨酸（Alliin），化学名S-烯丙基-L-半胱氨酸亚砜（S-Allyl-L-(+)-Cysteine Sulfoxid，SACS），是大蒜中主要生物活性物质之一，作为大蒜中独特的非蛋白类含硫氨基酸，占大蒜干重的0.6%-2%。在水中极易溶解，不溶于纯无水乙醇、氯仿、丙酮、乙醚和苯，以稀丙酮和乙醇结晶可得到白色针簇状结晶。现代医学表明：蒜氨酸具有抗肿瘤、协同降血压、抗菌杀毒、清除自由基、保肝护肝及抗糖尿病等多种药理功效。蒜氨酸无气味，未受损大蒜里面含量最丰富的有机硫化物。

目前，针对鲜蒜中蒜氨酸的提取工艺已有众多研究。例如中国专利申请03100420公开了一种从鲜蒜中提取蒜氨酸生产工艺，按以下步骤进行：第一步进行预处理：将蒜瓣进行微波杀酶处理；第二步进行有机物提取：将蒜瓣磨成蒜浆，并加入乙醇或酒精，分离得到提取液，并减压浓缩提取液；第三步用阳离子交换树脂吸附浓缩提取液中的蒜氨酸；第四步用氨水解析蒜氨酸；第五步得到结晶的蒜氨酸。中国专利申请201110139510公开了从大蒜中提取蒜氨酸的方法，其特征是包括如下步骤：(1)原料处理：将去皮鲜蒜灭酶，绞碎；(2)与水混合，浸提，过滤得滤液；(3)调pH值，保温，分离得上清液；(4)使pH值为7，保温分离得上清液，调节pH值；(5)将上清液采用离子交换树脂柱进行吸附；用氨水解析，收集解析液；(6)调节解析液的pH，过孔径为150Da 的纳滤膜，得到滤液；(7)将滤液浓缩干燥得到蒜氨酸。中国专利申请201210322853公开了一种一种脉冲超声辅助提取大蒜中蒜氨酸的方法，按照下述步骤进行：将鲜大蒜去皮、清洗后加入蒸馏水，采用水浴加热法对大蒜中的蒜氨酸酶进行灭活，再进行打浆破碎，浆液在一定条件下进行脉冲超声波处理，超声过的溶液经过离心得到上清液，再经超滤处理除去多糖、蛋白质等大分子杂质，收集滤液，冷冻干燥得到产品，测定产品的蒜氨酸含量并计算得率。

然而目前并没有从黑蒜中提取蒜氨酸的相关方法。鲜蒜中的蒜氨酸酶会将蒜氨酸转化成蒜辣素，因此从鲜蒜中提取蒜氨酸通常需要灭活蒜氨酸酶的步骤，通常采用微波或加热等方式，该步的加入使得蒜氨酸的提取工艺相对更为复杂，耗时更长，且如果蒜氨酸酶灭活不充分，在提取过程中会造成蒜氨酸的损失。此外鲜蒜中含有大量多糖和蛋白质等物质，在蒜氨酸提取过程中若处理不够彻底，将会造成制成品纯度相对较低的问题。

研究表明在黑蒜的生产过程中，蒜氨酸酶几乎完全被灭活，在制得的黑蒜成品中检测不到蒜氨酸酶的活性；且蛋白质和多糖等生物大分子被大量降解，因此从黑蒜中提取蒜氨酸将会比从鲜蒜中提取更加容易便捷。目前，仍未有从黑蒜中提取蒜氨酸的相关工艺，本发明将填补该领域的技术空缺。

发明内容

本发明的目的是提供一种从黑蒜中提取蒜氨酸的方法，以期更加高效地利用黑蒜资源。

一种从黑蒜中提取蒜氨酸的方法，包括以下步骤：

（1）、原料处理：将黑蒜绞碎，得到原料A；

（2）、高低温交替处理：将原料A在-10～-2℃冷冻2～6小时后，再于20～50℃下放置1～3小时；

（3）、重复步骤（2）2～4次，得到原料B；

（4）、浸提：按照1:1～5:1的液料比向原料B中加入浸提液后，打浆、过滤，将滤液于2000～5000rpm下离心后收集上清液；

（5）、吸附分离：将步骤（4）得到的上清液减压浓缩后，采用阳离子交换树脂吸附其中的蒜氨酸，用氨水解析，收集解析液；

（6）、调节解析液的pH，过滤，得到滤液，将滤液浓缩干燥得到蒜氨酸。

所述的提取方法步骤（2）中冷冻的温度优选为-8～-4℃；进一步优选为-7～-5℃；更进一步优选为-6℃。