[发明专利]链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂及其制备方法和应用有效
申请号: | 201611043729.2 | 申请日: | 2016-11-24 |
公开(公告)号: | CN106596920B | 公开(公告)日: | 2018-10-26 |
发明(设计)人: | 李志甲;郭安亮;姚见儿;朱凤;左红伟 | 申请(专利权)人: | 上海透景诊断科技有限公司 |
主分类号: | G01N33/533 | 分类号: | G01N33/533;G01N33/68 |
代理公司: | 上海唯源专利代理有限公司 31229 | 代理人: | 曾耀先 |
地址: | 201400 上海市*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 亲和 素藻红 蛋白 冷冻 稳定剂 及其 制备 方法 应用 | ||
本发明提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂,包括:聚乙烯吡咯烷酮类物质和碱性缓冲液。较佳地,聚乙烯吡咯烷酮类物质的含量为0.1%(v/v)‑10%(v/v),优选为0.5%(v/v)‑1%(v/v)。碱性缓冲液的浓度为0.01M‑0.05M。还包括:蛋白、表面活性剂、以及防腐剂(液体和/或固体)。还提供链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂的制备方法和应用。本发明的链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂能够使链霉亲和素藻红蛋白在冷冻条件下保持稳定,减少链霉亲和素藻红蛋白荧光信号的衰减,避免在荧光免疫等测定方法中导致错误的诊断结果,且设计巧妙,配制简便,成本低廉,适于大规模推广应用。
技术领域
本发明涉及蛋白稳定剂技术领域,特别涉及蛋白冷冻稳定剂技术领域,具体是指一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂及其制备方法和应用。
背景技术
藻红蛋白是从红藻中分离纯化的、目前普遍使用的新型荧光标记试剂。在特定波长激发下,藻胆蛋白能发射强烈的荧光,其荧光强度是荧光素的30-100倍。具有很好的吸光性能和很高的量子产率,在可见光谱区有很宽的激发及发射范围。
藻红蛋白易与抗体、生物素、亲合素、免疫蛋白等物质结合,制成荧光探针。通过检测其发出的荧光,可以用于荧光显微检测、荧光免疫测定、双色或多色荧光分析、癌细胞表面抗原检测、蛋白质和核酸等生物大分子的分析。用于免疫检测、荧光显微技术和流式细胞荧光测定等临床诊断及生物工程技术。
然而,链霉亲和素藻红蛋白(streptavidin phycoerythrin,简称SA-PE)具有在传统保存液中逐渐变性的性质,此外运输过程中往往由于外界温度而使其进入冷冻状态下,从而导致其加速变性和荧光值急剧下降,因此在荧光免疫等测定方法中会导致错误的诊断结果。
目前,常用的方式是在制备链霉亲和素藻红蛋白过程中进行修饰,以获得稳定的荧光信号,对于在实际应用中如何进一步保障荧光信号的稳定性,特别是冷冻状态下的荧光信号稳定性措施,未见报道。
因此,需要提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂,其能够使链霉亲和素藻红蛋白在冷冻条件下保持稳定,减少链霉亲和素藻红蛋白荧光信号的衰减,避免在荧光免疫等测定方法中导致错误的诊断结果。
发明内容
为了克服上述现有技术中的缺点,本发明的一个目的在于提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂,其能够使链霉亲和素藻红蛋白在冷冻条件下保持稳定,减少链霉亲和素藻红蛋白荧光信号的衰减,避免在荧光免疫等测定方法中导致错误的诊断结果,适于大规模推广应用。
本发明的另一目的在于提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂,其设计巧妙,配制简便,成本低廉,适于大规模推广应用。
本发明的另一目的在于提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂的制备方法,制备的链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂能够使链霉亲和素藻红蛋白在冷冻条件下保持稳定,减少链霉亲和素藻红蛋白荧光信号的衰减,避免在荧光免疫等测定方法中导致错误的诊断结果,适于大规模推广应用。
本发明的另一目的在于提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂的制备方法,其设计巧妙,操作简便,适于大规模推广应用。
本发明的另一目的在于提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂的应用,用于使链霉亲和素藻红蛋白在冷冻条件下保持稳定,减少链霉亲和素藻红蛋白荧光信号的衰减,避免在荧光免疫等测定方法中导致错误的诊断结果,适于大规模推广应用。
本发明的另一目的在于提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂的应用,其设计巧妙,使用简便,适于大规模推广应用。
为达到以上目的,在本发明的第一方面,提供一种链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂,其特点是,所述链霉亲和素藻红蛋白冷冻稳定剂包括:聚乙烯吡咯烷酮类物质和碱性缓冲液。
较佳地,所述聚乙烯吡咯烷酮类物质的含量为0.1%(v/v)-10%(v/v)。
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