[发明专利]一种制备花色苷的方法

说明书

本发明公开了一种制备花色苷的方法，即生物二次发酵微纳滤与RO复合法。主要步骤包括二次发酵、护色、冷处理、多级离心、多级错流膜微滤、纳滤与反渗透、干燥粉碎等单元操作。该方法是集发酵、提取、浓缩和干燥粉碎等技术为一体，全过程是在一密闭洁净环境中进行，不会产生跑、冒、滴、漏现象。与传统方法相比，本发明方法具有如下特点：（1）完全摆脱了溶剂的参与，是一种真正的无溶剂提取法，因此，也就无需担忧提取过程中溶剂造成的一系列问题；（2）本方法中的生物二次发酵法不仅可以最大限度地溶出花色苷，而且还可以合成新的花色苷和对花色苷具有辅色作用的辅色素；（3）本方法是一种多功能的复合方法，条件温和，环保节能，适用面广。

技术领域

本发明属于生物与制药工程和技术领域，具体地说涉及一种制备花色苷的方法。

背景技术

花色苷是花色素与糖以糖苷键结合而成的一类化合物，广泛存在于植物的花、果实、茎、叶和根器官的细胞液中，使其呈现由红、紫红到兰等不同颜色。花色苷属于类黄酮——它是以黄酮核为基础的一类物质中能呈现红色的一族化合物。现代科学研究表明，花色苷类色素不仅是食用色素中人们最熟知的一大类天然色素，是许多国家和地区允许按需要量在果酒、果汁、饮料、糖果、冰淇淋和果酱等产品中使用的理想着色剂。花色苷还具有清除体内自由基、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抑制脂质过氧化和血小板凝集、预防糖尿病、减肥、保护视力等生物与药理活性，对多种疾病具有预防和治疗作用。作为一种天然色素，花色苷安全、无毒（如早在1982年，联合国FAO/WHO联合食品添加剂专家委员会（JECFA）就对葡萄皮花色苷提取物的毒理学安全性作了系统评估，包括急性毒性、致突变、生殖毒性和致畸毒性实验，认为其属实际无毒类。），且对人体具有多种保健功能，已被应用于食品、保健品、化妆品、医药等行业。尤其是近年来随着人们生活水平的提高和安全意识的增强，传统常用的价格低廉的化学合成色素因其固有的毒副作用和致癌的可能性引起了人们的焦虑和不安,于是，安全无毒副作用的花色苷的研究与开发引起了人们的广泛兴趣。虽然人们对花色苷的来源种类、理化特性和生理药理功能已进行了大量研究，但目前，关于花色苷的制备方法，尤其是能用于工业化生产的方法，研究的还很少，致使其生产成本高难以大规模普及应用。见于报道的制备花色苷的方法，主要还是传统的溶剂提取法、微波提取法、超声提取法和酶提取法等。溶剂提取法是最为经典的制备花色苷的方法，常用的溶剂有：盐酸、甲醇、乙醇、丙酮、硫酸、乙酸、柠檬酸等，这些溶剂中有的易燃易爆，有的剧毒，这种方法虽可以较有效的用于制备花色苷，但随着国家对环保和安全生产的重视和一系列法规的实施，所用溶剂造成的环境污染和生产安全事故的不慎发生以及由于溶剂残留对产品造成的潜在危害，它将会逐渐被淘汰；微波提取法和超声提取法也只能是溶剂提取法的辅助方法，其过程还是以溶剂为主要媒介；酶提取法虽然具有酶的高效性和专一性及作用条件的温和性等优点，但单一酶很难从植物组织中溶出花色苷，必需用复合酶才有效，其实，从本质上说，酶提取法也还是溶剂提取法的辅助方法，它并没有摆脱溶剂的参与，只是可能会有助于减少或降低溶剂的用量罢了。

发明内容

针对上述技术方法的不足或缺陷，本发明公开了一种制备花色苷的方法——生物二次发酵微纳滤与RO复合法。

本发明是这样实现的：

本发明提供一种制备花色苷的方法。该方法包含以下工艺步骤：

a.原料选用 选用烟73、烟74、夏黑葡萄品种或其它富含花色苷的可发酵的材料，原料为无病害、无腐烂并干净无杂质；

b.除梗破碎 在葡萄原料除梗破碎时采用先除梗后破碎的方法以尽可能的除净果梗；

c.一次发酵 破碎后的葡萄果浆直接用泵打入发酵罐，然后，接种发酵，发酵温度15-32℃，发酵时间2-20天，在糖度（以葡萄糖计）小于4g/L时，或者当总糖与总酸（以酒石酸计）的差值小于2g/L，含糖量低于9g/L时，结束发酵；