[发明专利]检测尿液中单羟酚类代谢物的试剂盒及其制备方法有效
| 申请号： | 201611023274.8 | 申请日： | 2016-11-21 |
| 公开（公告）号： | CN106645120B | 公开（公告）日： | 2019-01-15 |
| 发明（设计）人： | 余柯辰 | 申请（专利权）人： | 江苏华鸣生物科技有限公司 |
| 主分类号： | G01N21/78 | 分类号： | G01N21/78 |
| 代理公司： | 无锡华源专利商标事务所(普通合伙) 32228 | 代理人： | 聂启新 |
| 地址： | 214000 江苏省无锡市惠山经*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 代谢物 单羟酚 气凝胶 尿液 检测试剂 壳聚糖 试剂盒 吸附 制备 检测 复合纤维素 特异性检测 显色混合物 制备壳聚糖 中间代谢物 纤维素 酪氨酸酶 色氨酸酶 显色试剂 显示颜色 安瓿瓶 酪氨酸 酶固定 色氨酸 准确率 分层 盛装 分解 | ||
1.检测尿液中单羟酚类代谢物的试剂盒，包括盛装有检测试剂的安瓿瓶，其特征在于所述检测试剂为吸附有显色混合物的壳聚糖复合纤维素气凝胶；
所述吸附有显色混合物的壳聚糖复合纤维素气凝胶的制备方法为：
(1)将天然纤维素进行溶解，得到纤维素溶液，再将纤维素溶液流延或涂覆成膜状，通过凝固再生和水洗，制备成厚度为20～25微米的纤维素膜；
(2)在步骤(1)制备得到的纤维素膜上流延或涂覆一层壳聚糖溶液，凝固后得到一层厚度为20～25微米的壳聚糖膜；
(3)用无水乙醇对步骤(2)得到的纤维素-壳聚糖复合膜进行置换，去除其中的水分，然后将纤维素-壳聚糖复合膜反转放置，使纤维素膜位于上方；
(4)在步骤(3)得到的纤维素-壳聚糖复合膜的纤维素膜上流延或涂覆一层壳聚糖溶液，凝固后得到一层厚度为20～25微米的壳聚糖膜，得到壳聚糖-纤维素-壳聚糖复合膜；
(5)用无水乙醇对步骤(4)得到的壳聚糖-纤维素-壳聚糖复合膜进行置换，去除其中的水分，然后经冷冻干燥或临界干燥，得到壳聚糖-纤维素-壳聚糖复合气凝胶；
(6)将酪氨酸酶和色氨酸酶按照2:1的质量比混合均匀得到酶混合物，并且将高碘酸钠和2,4-二硝基苯阱、氢氧化钠按照2:1:0.5的质量比混合均匀得到标记混合物；
(7)将酶混合物和标记混合物按照2～3:1的质量比混合，然后置于去离子水配制成固体质量分数为15～20％的混悬液，然后将步骤(5)得到的复合气凝胶放入该混悬液中，在水浴振荡器中振荡固定3～5小时，即得。
2.根据权利要求1所述的检测尿液中单羟酚类代谢物的试剂盒，其特征在于所述酪氨酸酶和色氨酸酶为市售哺乳动物酪氨酸酶和色氨酸酶。
3.根据权利要求1所述的检测尿液中单羟酚类代谢物的试剂盒，其特征在于所述酪氨酸酶和色氨酸酶为市售人酪氨酸酶和色氨酸酶或大鼠酪氨酸酶和色氨酸酶。
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