[发明专利]一种泛耐药菌的纳米疫苗及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及细菌疫苗领域，具体地，涉及一种泛耐药菌的纳米疫苗及其制备方法。

背景技术

纳米疫苗是当今生命科学研究的热点之一,是基于纳米技术研发的一种新型疫苗,具有安全、稳定、高效、无需佐剂等特点,具有良好的发展前景。

纳米疫苗血清稳定性良好，且纳米疫苗接种后，启动完全模拟病原体的免疫反应，产生针对此种病原体的高滴度的特异性抗体及记忆性B细胞。当病原体感染免疫过的动物时，动物不会出现感染性疾病。

但是，目前只有使用细菌外膜囊泡包被的纳米颗粒。由于在不同的培养条件下，得到的外膜囊泡成分不一样。而且细菌外膜囊泡上含有的抗原只是细胞膜上的部分抗原。所以使用外膜囊泡包被纳米颗粒制备的疫苗存在不足。

此外，对于细菌外膜囊泡，仅G-菌和少部分G+可以分泌外膜囊泡，故而，使用外膜囊泡来制备细菌疫苗无法普遍的适用于所有细菌，故而，使该种制备疫苗的方法受到限制。

发明内容

本发明旨在克服上述缺陷，提供应用前景广阔的纳米疫苗。

具体地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗，其特征在于：由细菌细胞膜和纳米颗粒组成；

其中，上述细菌细胞膜包裹于纳米颗粒的外表面。

该纳米颗粒可选自任何可作为生物载体等功能的纳米材料，优选如：金属纳米颗粒、蛋白纳米颗粒、高分子纳米颗粒等。

另外，本发明还提供了上述一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，其特征在于：在机械力的作用下，采用挤入包裹的方式，将细菌细胞膜包被于纳米颗粒的表层形成细菌疫苗。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、上述细菌细胞膜的用量为纳米颗粒的表面积与细菌细胞膜的表面积比值的1-1.5倍。即、根据不同纳米颗粒的表面积/平均表面的大小，以及不同分离获得的细菌细胞膜的表面积/平均表面的大小，通过计算机计算的方式计算出每个纳米颗粒需要包裹的细菌细胞膜的数量后进行配比。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、上述纳米颗粒的粒径为10-200nm优选为30-100nm。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、上述纳米颗粒选自金属纳米颗粒、蛋白纳米颗粒、高分子纳米颗粒中的一种。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、上述金属纳米颗粒选自纳米金、纳米银、纳米铁；

上述蛋白纳米颗粒来源于动物蛋白质或植物蛋白质；

上述高分子纳米颗粒选自聚乳酸类高分子聚合物。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、上述蛋白纳米颗粒选自来源于酪蛋白、乳清蛋白胶原质、鸡卵清蛋白、牛血清蛋白、大豆蛋白、牛奶蛋白或小麦麦质的蛋白纳米材料中的一种。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、上述高分子纳米颗粒选自PGLC、PLGE、PLLA、PLGA中的一种。

进一步地，本发明提供的细菌疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、具体制造方法如下所示：

步骤一、培养细菌；

步骤二、去除细胞壁；如：使用溶菌酶去除细胞壁等方案

步骤三、离心分离、收集细菌细胞膜。

步骤四、合成纳米材料；该纳米材料一般由热聚法合成；也可以为使用现有的纳米材料。

步骤五、将细菌细胞膜和纳米颗粒混合，在机械力的作用下，将细菌细胞膜包裹在纳米颗粒表层。

该机械力搅拌的过程一般为0.5-72小时不等。

该过程一般通过多次过膜(如：7-10次左右)的方式来实现，其后采用透析过滤/超滤等类似的材料来实现，排除未成型的杂质，获得目标粒径疫苗的结果。

进一步地，本发明提供的一种泛耐药菌的纳米疫苗的制备方法，还具有这样的特点：即、在步骤一中，当细菌为含有荚膜的细菌时，通过调整培养条件(如：改变培养基成分，pH值，CO₂浓度等条件)，使细菌不产生荚膜。

本发明的作用和效果：

本发明提供了一种全新的，采用细菌细胞膜制备的纳米细菌疫苗。