[发明专利]一种PRRSV、SIV、猪HEV抗体的液相芯片多重检测试剂盒

说明书

技术领域

本发明涉及检测技术领域，更具体地，涉及一种PRRSV、SIV、猪HEV抗体的液相芯片多重检测试剂盒。

背景技术

液相芯片技术也被称为xMAP技术(flexible multiple-analyte profiling)，是一种集流式细胞技术、激光技术、数字信号处理技术及化学为一体的新型生物分子检测技术，是最早通过美国食品与药物管理局(FDA)认证的可用于临床诊断的生物芯片技术。目前已经推出第三代检测技术---Flexmap3D，与上一代检测技术相比较，Flexmap3D更加高效，可以同时对一个样本中的500种不同目的分子进行检测，并且可以一次检测384个不同样本，是一种高效检测的方法。

猪流感(Swine Influenza，SI)是猪流感病毒(Swine Influenza virus，SIV)引起的一种急性、热性、高度接触性呼吸道传染病，临床上以突发、咳嗽、高热、呼吸困难、精神沉郁、高发病率、低病死率为特征。目前，全球猪群中以经典猪流感H1N1和类人H3N2亚型为主广泛流行，尽管猪流感死亡率低，但是其可造成其他病原的继发感染，对养殖业造成巨大的经济损失。猪是人、禽流感病毒的易感宿主，是流感病毒跨种传播的中间宿主，是流感病毒基因重组的“混合器”，是引起流感大爆发的重要原因。2009年，甲型H1N1流感病毒(pdm2009)在墨西哥、美国相继爆发，该流行毒株是由人流感、猪流感和禽流感病毒基因自然重组而形成的一种新型流感病毒。该毒株的PB1基因来于H3N2人流感，PA和PB2基因来自于北美禽流感，NA和M基因来自欧亚类禽猪流感，HA、NP和NS基因来自经典猪流感。该毒株能通过抗原的变异逃避机体的免疫系统，短时间内迅速蔓延至全球，造成流感的大流行，而引起人们的关注。在猪场内进行定期的SIV抗体监测对于预防其它疾病的出现，以及在人群中流行具有重要的公共卫生学意义。

戊型肝炎(Hepatitis E，HE)是由戊型肝炎病毒(Hepatitis E virus，HEV)引起的以黄疸为主要表现的急性病毒性肝炎，主要经粪-口途径传播。该病主要流行于卫生设施不完善的发展中国家(如亚洲和非洲)，在发达国家(如美国和一些欧洲国家)也存在散发的情况。戊型肝炎的致死率(1～4％)比甲型肝炎(0.1～2％)的致死率要高，并且对孕妇的致死率能高达30％。

HEV具有一个血清型，四个基因型，基因1和2型只感染人，主要流行于亚洲、非洲、墨西哥。基因3、4型宿主范围较广，除了可感染人和家猪外，也可感染鸡、鹿、兔子、老鼠等其他动物。基因3型主要流行于美国、加拿大、阿根廷、西班牙、法国、澳大利亚、荷兰、新西兰等。基因4型分布在中国，日本，印度和越南。因此，戊型肝炎已经是一个重要的公共卫生问题而不只是食物安全和人畜共患病等潜在的风险。

猪繁殖与呼吸系统综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome，PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus，PRRSV)引起的一种以母猪繁殖障碍和仔猪呼吸道疾病为特征的高度接触性传染病，主要表现为怀孕母猪后期流产、早产、死胎及木乃伊胎，仔猪发生呼吸系统疾病，并大量死亡。1987年，美国中西部首先爆发该病，并迅速波及其他国家。我国于1996年首次报道该病，并分离到第一株PRRSV。2006年，我国爆发了以高热高死亡为特征的高致病性猪繁殖与呼吸系统综合征(HP-PRRS)，其传播迅速、持续时间长，给我国的养殖业带来了巨大的经济素损失，PRRS已经成为危害全球养猪业的重要传染病之一。为减少该病对来损失，对于大型集约化养殖场，针对PRRSV进行血清的抗体监测格外重要。目前主要采用酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA)，由于其敏感度和特异性好，成为许多国家监测和诊断PRRSV的主要方法。尽管如此，ELISA方法无法用于多重诊断；而且当前亟缺一种新的方法，用于对ELISA方法的校对。

现有技术中虽然有一些分别针对猪PPRSV、HEV和SIV抗体的检测方法，但其检测较为繁琐，且检测时间长。现有技术缺乏一种能同时检测PPRSV、HEV和SIV三种抗体的检测方法。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术存在的上述缺陷，提供一种猪PRRSV、SIV、HEV抗体的液相芯片多重检试剂盒。

本发明的目的是通过以下技术方案予以实现的：