[发明专利]测定甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法有效
申请号: | 201611012073.8 | 申请日: | 2016-11-17 |
公开(公告)号: | CN108072708B | 公开(公告)日: | 2019-06-14 |
发明(设计)人: | 孙继林;胡昌江;李艺丹;张婷婷 | 申请(专利权)人: | 四川辅正药业股份有限公司 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人: | 李高峡;左翔 |
地址: | 641400 四川省*** | 国省代码: | 四川;51 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 甘草酸 雪胆 甘草 对照品溶液 供试品溶液 制备 标准曲线 待测样品 含量测定 有效保障 质量控制 监控 成功 | ||
1.测定甘草制雪胆中甘草酸含量的HPLC方法,其特征在于:它包括以下步骤:
(1)甘草酸标准曲线的建立:
a、对照品溶液的制备:
取甘草酸对照品,加甲醇配制成对照品溶液;
b、对照品溶液的测定:
配制系列浓度的对照品溶液,分别注入高效液相色谱仪检测,测定色谱峰面积,得到甘草酸的标准曲线;
色谱条件如下:
色谱柱:Diamonsil-C18柱,规格为:内径4.6mm,长度250mm,填料粒径5μm;
检测波长:250nm;
流动相:A为乙腈;B为0.05%磷酸水溶液,梯度洗脱程序如下:
(2)待测样品中甘草酸的含量测定:
c、供试品溶液的制备:
取待测样品,加70%甲醇提取,过滤得供试品溶液;
d、供试品溶液的测定:
取供试品溶液,注入高效液相色谱仪,以步骤b相同的色谱条件检测,根据步骤(1)的标准曲线得到待测样品中甘草酸的含量;
所述甘草制雪胆是通过下述方法制备得到的:取雪胆饮片,加入甘草汁,拌匀,闷润7.5h,在80℃下烘12h,放凉即得;所述雪胆饮片与甘草的重量比为5:2。
2.根据权利要求1所述的HPLC方法,其特征在于:所述色谱条件的柱温为25℃~35℃。
3.根据权利要求1所述的HPLC方法,其特征在于:所述色谱条件的柱温为30℃。
4.根据权利要求1~3任意一项所述的HPLC方法,其特征在于:所述色谱条件的流速0.8~1.2mL/min。
5.根据权利要求1~3任意一项所述的HPLC方法,其特征在于:所述色谱条件的流速1.0mL/min。
6.根据权利要求1所述的HPLC方法,其特征在于:步骤(2)中,所述提取是超声提取或回流提取。
7.根据权利要求6所述的HPLC方法,其特征在于:步骤(2)中,所述提取是超声提取30分钟。
8.根据权利要求1所述的HPLC方法,其特征在于:步骤(2)中,所述甲醇与待测样品的体积质量比为50mL:1g。
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