[发明专利]一种马钱子碱提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种马钱子碱提取方法。

背景技术

风湿马钱片具有显著的祛风、除湿、镇痛作用，标本兼治，能迅速缓解和改善风湿、类风湿和坐骨神经痛症状。处方中马钱子粉为主要成分，马钱子中生物碱的种类较多，各类生物碱的理化性质差异较小，分离困难。马钱子的主要成分是马钱子碱和士的宁。马钱子碱具有通络止痛、散结消肿的功效。

中药样品基体复杂，前处理手段必不可少。固相萃取是一项结合了选择性保留、选择性洗脱等过程的分离技术，具有分离效率高、处理样品容量大、有机溶剂耗用量小等优点，成为近年来应用较多的中药前处理方法，中药制剂中的马钱子碱具有一定的药理作用，但测定过程中其他成分干扰严重，不能准确对其进行定性定量分析。传统方法采用液液萃取法分离马钱子碱，步骤

繁琐且条件不宜控制。

发明内容

本发明提出一种简单、精确、快速地分离风湿马钱片中的马钱子碱的方法。

本发明一种马钱子碱提取方法，包括以下步骤：

（1）取风湿马钱片，用50％的乙醇除去包衣，研磨成粉末；

（2）称粉末3g，用滤纸包好放入150 mL的索氏提取器中；

（3）取70mL的石油醚置于圆底烧瓶中，加热回流3小时，取出粉末真空烘干，然后放冷后置于索式提取器中，

（4）取60mL氯仿置圆底烧瓶中，加热回流3h，重复2次；

（5）合并氯仿提取液，旋蒸，用纯甲醇溶解，转移到容量瓶中，定容到刻度；

（6）用微孔滤膜过滤，取滤液，即得粗提品；

（7）取粗提品，转移到预洗过的PXC柱上待净化，分别使用5mL体积分数为10％的甲醇淋洗，真空抽干，用5mL含5％氨水的70％的甲醇洗脱，烘干馏出液，得到马钱子碱。

优选地，所述步骤（3）中的烘干温度为30℃，时长为25分钟。

优选地，所述PXC柱为60mg，3mL。

本方所述一种马钱子碱提取方法，步骤简单可精确、快速地分离风湿马钱片中的马钱子碱，纯化处理后采用高效液相色谱法测定马钱子碱的含量高达75%。

具体实施方式

本发明一种马钱子碱提取方法，包括以下步骤：

（1）取风湿马钱片，用50％的乙醇除去包衣，研磨成粉末；

（2）称粉末3g，用滤纸包好放入150 mL的索氏提取器中；

（3）取70mL的石油醚置于圆底烧瓶中，加热回流3小时，取出粉末真空烘干，然后放冷后置于索式提取器中，

（4）取60mL氯仿置圆底烧瓶中，加热回流3h，重复2次；

（5）合并氯仿提取液，旋蒸，用纯甲醇溶解，转移到容量瓶中，定容到刻度；

（6）用微孔滤膜过滤，取滤液，即得粗提品；

（7）取粗提品，转移到预洗过的PXC柱上待净化，分别使用5mL体积分数为10％的甲醇淋洗，真空抽干，用5mL含5％氨水的70％的甲醇洗脱，烘干馏出液，得到马钱子碱。

优选地，所述步骤（3）中的烘干温度为30℃，时长为25分钟。

优选地，所述PXC柱为60mg，3mL。

分别精密量取1 mL制备好的风湿马钱片供试品溶液，转移到预洗过的小柱、炭黑小柱、自制MIP分子印迹填充小柱、PXC小柱上待净化，分别使用5mL的水淋洗，真空抽干，用5 mL含5％氨水的70％的甲醇洗脱，烘干流出液，用2 mL甲醇溶液定容，进样测定。对比回收率，小柱为50.3%、炭黑小柱10.9%、自制MIP分子印迹填充小柱90.3%、PXC小柱97.3%。

精密量取1mL样品，转移到已活化好的PXC小柱上，然后分别用5％～100％的甲醇水溶液淋洗，分析检测流出液中的马钱子碱，甲醇水溶液体积分数为30％时，淋洗液会将马钱子碱洗出，而体积分数低于10％时，马钱子碱完全没有流出。将淋洗液设定为10％的甲醇水溶液，可以最大限度地去除弱于马钱子碱的干扰物。

取样品按照确定好的固相萃取条件净化后检测，固相萃取净化前在马钱子碱主峰前有一个杂质峰严重干扰马钱子碱的准确测定，固相萃取后的样品有效消除了杂质干扰，且马钱子碱的回收率为94％。