[发明专利]一种恩拉霉素的提纯方法及其应用

说明书

本发明提供一种恩拉霉素的提纯方法及其应用。所述提纯方法包括：利用酸性丙酮水溶液对恩拉霉素粗品进行浸提，获得恩拉霉素浸提液，再将其蒸馏除去丙酮得到恩拉霉素粗提物，最后除去上清液，烘干即得恩拉霉素精品。本发明所提供的方法克服现有的恩拉霉素提取工艺中存在的工艺过程繁杂、生产周期长、生产过程污染排放多的缺陷，提高生产过程的效率，减少资源浪费和环境污染，获得纯度较高的恩拉霉素产品。

技术领域

本发明涉及化学制药领域，更具体地，涉及一种饲料添加剂恩拉霉素的提纯方法及其应用。

背景技术

恩拉霉素(Enramycin)是由土壤中分离出来的放线菌StreptomycesfungicidiousNO.B5477发酵产生的一种由不饱和脂肪酸和十几种氨基酸结合成的多肽类抗生素。其中氨基酸分子构成环状多肽结构，脂肪酸位于多肽结构末端。据其末端脂肪酸种类不同，分为恩拉霉素A和B，恩拉霉素则是由这两种成分组成的混合物。其对革兰氏阳性菌有很强的抑制作用，长期使用后不易产生抗药性，且能改变肠道内的细菌群落分布，有利于饲料营养成份的消化吸收，促进动物增重和提高饲料利用率，因此被世界上许多国家推荐作为抗生素促生长剂。

恩拉霉素的发酵过程是一个复杂的微生物代谢过程,恩拉霉素粗产品中副产物众多,因此恩拉霉素粗品的分离纯化工艺较为复杂。现有的恩拉霉素纯化的方法有以下几种：

日本武田医药公司采用多孔苯乙烯-二乙烯苯聚合物大孔吸附树脂AmberliteXAD-2对恩拉霉素样品进行层析，成功的分离出了恩拉霉素A和B组分，同时采用梯度洗脱对恩拉霉素A和B进行定量分析。

王丹丹等(大孔树脂分离纯化持久霉素[J].食品与发酵工业,2010,36(4):194-196)采用几种型号大孔树脂提取恩拉霉素实验对比，Ab-8大孔树脂提取效果较为理想。以发酵后的菌丝体为原料，经过细胞破碎、恩拉霉素粗提物的制备、大孔树脂的吸附、梯度洗脱和浓缩干燥的过程得到纯度较高的恩拉霉素，再经过葡聚糖凝胶纯化后，恩拉霉素的相对含量可达到95％以上。

顾欣等(饲料中恩拉霉素的微生物学含量测定方法研究[J].中国兽药杂志,2008,42(9):17-21)将饲料样品经酸性甲醇溶液提取，并采用大孔吸附树脂Amberlite XAD-2层析柱吸附洗脱后，使饲料中的恩拉霉素也能到很好的分离纯化。

不同的上述方法得到的产品纯度及收率都还有待于进一步提高，且提纯工艺均较为复杂。因此有必要提供一种工艺过程更简便、生产周期更短的恩拉霉素提取工艺，以期推动恩拉霉素应用领域的发展。

发明内容

为了解决现有技术中存在的上述问题，本发明提供一种生产工艺简便、生产周期短、环境友好、产率高和纯度高的恩拉霉素提纯方法。

本发明提供了一种恩拉霉素的提纯方法，包括：

利用酸性丙酮水溶液对恩拉霉素粗品进行浸提，获得恩拉霉素浸提液，再将其蒸馏除去丙酮得到恩拉霉素粗提物，最后除去上清液，烘干即得恩拉霉素精品。

优选地，所述酸性丙酮水溶液的pH值为1.5-5；优选为2-4。

优选地，使用盐酸将丙酮水溶液调成酸性。

优选地，所述丙酮的水溶液中丙酮和水的体积比为0.5-5:1，优选为1-2:1。

优选地，所述相对于50g恩拉霉素粗品，所述酸性丙酮水溶液的用量为250ml-1200ml，进一步优选为600ml-1000ml，更优选为700ml-800ml。

优选地，所述浸提的温度高于室温且低于丙酮的沸点值，优选为38℃-42℃。

优选地，所述浸提的时间为0.5h-5h，优选为1h-2h。

优选地，还包括在浸提前将浸提体系在50Hz-150Hz的超声波下超声混匀0.5h-1h。