[发明专利]化学反应联合多级发酵制备含海藻寡糖微量元素液体肥的方法

权利要求书

1.一种化学反应联合多级发酵制备含海藻寡糖微量元素液体肥的方法，其特征在于包括

以下步骤：

1）、将新鲜的海藻用自来水洗净、除去杂质，浸泡12～20h后，用磨浆机研磨，将研磨后的浆料转入发酵罐内，加入浆料质量5～8倍的水；

2）、向发酵罐中投入第一批反应物，反应物质量为浆料质量的0.5%～2%，第一批反应

物的组成为：1～2份焦磷酸钾，0.5～1.0份氨水，1.5～2份碳酸钾；然后将发酵罐密闭，升温至50～60℃，搅拌反应45～60min；

3）、向发酵罐中投入第二批反应物，反应物质量为浆料质量的1%～3%，第二批反应物的组成为：1.5～2份氨水，2～3份氢氧化钾；升温至70～85℃，维持发酵罐压力为0.02～0.05Mpa，搅拌反应90～120min；

4）、向发酵罐中加入淀粉，加入量为5～10g/L，调节罐内pH值为7.5～7.8，升温至115～121℃，灭菌15～30min，冷却至30～35℃；

5）、一级发酵：向发酵罐中接种解淀粉芽胞杆菌菌液，接种量为物料体积的7%～12%，调节空气流速使溶氧控制在20～25%，罐内压力为0.02～0.08Mpa，转速为150～250r/min，通气量为1000～2000L/min，发酵温度为28～33℃，发酵时间为12～24h；

6）、二级发酵：向发酵罐中加入经过灭菌的葡萄糖，加入量为5～10g/L，然后接种淡紫拟青霉菌液，接种量为物料体积的5%～10%，调节空气流速使溶氧控制在25～30%，罐内压力为0.02～0.05Mpa，转速为150～200r/min，调节通气量至1000～2000L/min，发酵温度为25～30℃，发酵时间为12～24h；

7）、三级发酵：向发酵罐中加入经过灭菌的豆饼粉，加入量为5～10g/L，然后接种多粘类芽胞杆菌菌液，接种量为物料体积的7～15%，调节空气流速使溶氧控制在26～30%，罐内压力为0.02～0.04Mpa，转速为150～200r/min，调节通气量至1000～2000L/min，发酵温度为28～35℃，发酵时间为12～24h；

8）、停止通入空气，泄压，向发酵罐中依次加入物料总质量4%～5%的硅酸盐，物料总质量3%～4%的钼酸盐，物料总质量10%～15%的硼酸盐，物料总质量15%～20%的EDTA螯合铁，物料总质量5%～8%的EDTA螯合铜，物料总质量15%～20%的EDTA螯合锌和物料总质量5%～7%的EDTA螯合锰，搅拌溶解，经过离心过滤得含海藻寡糖液体肥；

所述的份均为质量份。

2.如权利要求1所述的化学反应联合多级发酵制备含海藻寡糖微量元素液体肥的方法，其特征在于所述的解淀粉芽胞杆菌菌液的制备方法是：将解淀粉芽胞杆菌菌体接种到培养基中，在31℃下培养18～20h；其中培养基组成：蛋白胨 5.0g，牛肉浸取物 3.0g，酵母浸粉3.0g，NaCl 5.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。

3.如权利要求1所述的化学反应联合多级发酵制备含海藻寡糖微量元素液体肥的方法，其特征在于所述的淡紫拟青霉菌液的制备方法是：将淡紫拟青霉菌体接种到培养基中，在28℃下培养14-18h；其中培养基组成：蔗糖 30.0g，NaNO₃ 3.0g，MgSO₄·7H₂O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO₄·4H₂O 0.01g，K₂HPO₄ 1.0g，蒸馏水 1.0L，pH6.0～6.5。

4.如权利要求1所述的化学反应联合多级发酵制备含海藻寡糖微量元素液体肥的方法，其特征在于所述的多粘类芽胞杆菌菌液的制备方法是：将多粘类芽胞杆菌菌体接种到培养基中，在30℃下培养15-20h；其中培养基组成：牛肉膏 10.0g，蛋白胨 10.0g，葡萄糖 10.0g，NaCl 5.0g，K₂HPO₄ 2.0g，蒸馏水 1.0L，pH7.0。

5.如权利要求1所述的化学反应联合多级发酵制备含海藻寡糖微量元素液体肥的方法，其特征在于：步骤6）中葡萄糖的灭菌条件是在105℃灭菌15min；步骤7）豆饼粉的灭菌条件是在115℃灭菌20min。