[发明专利]霍山石斛特异性分子标记及其检测方法有效
| 申请号: | 201610971089.5 | 申请日: | 2016-10-28 |
| 公开(公告)号: | CN107630068B | 公开(公告)日: | 2021-02-26 |
| 发明(设计)人: | 黄璐琦;袁媛;赵润怀;蒋超;罗宇琴;肖苏萍;王继永;兰青山;成彦武;焦连魁 | 申请(专利权)人: | 中国中药公司;中国中医科学院中药研究所;中国中药霍山石斛科技有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12N15/11 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;何叶喧 |
| 地址: | 100195 北京市海*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 霍山 石斛 特异性 分子 标记 及其 检测 方法 | ||
1.一种鉴定或辅助鉴定霍山石斛的方法,包括如下步骤:提取待测样本的基因组DNA,以待测样本的基因组DNA为模板,采用引物HSSH-1.F和引物HSSH-1.R组成的引物对进行PCR扩增,如果扩增产物中含有200bp-300bp的DNA片段,待测样本为或候选为霍山石斛,如果扩增产物中不含有200bp-300bp的DNA片段,待测样本为或候选为非霍山石斛;
所述引物HSSH-1.F为序列表的序列2所示的单链DNA分子;
所述引物HSSH-1.R为序列表的序列3所示的单链DNA分子。
2.一种鉴定或辅助鉴定霍山石斛的方法,包括如下步骤:检测待测样本的基因组DNA中特异SNP位点的基因型,如果所述特异SNP位点的基因型为GG基因型,待测样本为或候选为霍山石斛,如果所述特异SNP位点的基因型为非GG基因型,待测样本为或候选为非霍山石斛;
所述特异SNP位点为石斛属植物基因组中序列表的序列1自5’末端第190位核苷酸。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于:所述“检测待测样本的基因组DNA中特异SNP位点的基因型”的实现方法如下:提取待测样本的基因组DNA,以所述基因组DNA为模板,采用引物HSSH-1.F和引物HSSH-1.R组成的引物对进行PCR扩增,然后将PCR扩增产物进行测序;
所述引物HSSH-1.F为序列表的序列2所示的单链DNA分子;
所述引物HSSH-1.R为列3所示的单链DNA分子。
4.一种检测石斛属植物的基因组DNA中特异SNP位点的方法,包括如下步骤:提取待测样本的基因组DNA,以所述基因组DNA为模板,采用引物HSSH-1.F和引物HSSH-1.R组成的引物对进行PCR扩增,然后将PCR扩增产物进行测序;
所述引物HSSH-1.F为序列表的序列2所示的单链DNA分子;
所述引物HSSH-1.R为序列表的序列3所示的单链DNA分子;
所述特异SNP位点为石斛属植物基因组中序列表的序列1自5’末端第190位核苷酸。
5.一种检测石斛属植物的基因组DNA中特异SNP位点的方法,包括如下步骤:提取待测样本的基因组DNA,以待测样本的基因组DNA为模板,采用引物HSSH-1.F和引物HSSH-1.R组成的引物对进行PCR扩增,如果扩增产物中含有200bp-300bp的DNA片段,待测样本的基因组DNA中特异SNP位点的基因型为GG,如果扩增产物中不含有200bp-300bp的DNA片段,待测样本的基因组DNA中特异SNP位点的基因型为非GG;
所述引物HSSH-1.F为序列表的序列2所示的单链DNA分子;
所述引物HSSH-1.R为序列表的序列3所示的单链DNA分子;
所述特异SNP位点为石斛属植物基因组中序列表的序列1自5’末端第190位核苷酸。
6.一种特异DNA分子,如序列表的序列1所示。
7.权利要求6所述的特异DNA分子在鉴定或辅助鉴定霍山石斛中的应用。
8.特异引物对,由引物HSSH-1.F和引物HSSH-1.R组成;
所述引物HSSH-1.F为序列表的序列2所示的单链DNA分子;
所述引物HSSH-1.R为序列表的序列3所示的单链DNA分子。
9.权利要求8所述特异引物对在鉴定或辅助鉴定霍山石斛中的应用。
10.含有权利要求8所述特异引物对的试剂盒;所述试剂盒的应用为鉴定或辅助鉴定霍山石斛。
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