[发明专利]一种磁性纤维素微球固定化脂肪酶催化剂的制备方法

权利要求书

1.一种磁性纤维素微球固定化脂肪酶催化剂的制备方法，具体包括如下步骤：

(1)热熔胶转化法制备再生纤维素微球：脱脂棉、棉麻纤维、微晶纤维素、玻璃纤维中的一种或几种，经碱化破除氢键，再进行老化降低分子聚合度，然后磺化成可溶性的纤维素粘胶液，再加入制孔剂碳酸钙搅拌均匀；将纤维素胶粘液加入分散相中，利用反相悬浮技术分散成液滴，同时升温固化成球形，并利用碳酸钙和盐酸发生的复分解反应对纤维素微球制孔；

(2)化学改性：用环氧氯丙烷对制孔后的纤维素微球改性，使纤维素分子结构中引入环氧基团，再用乙二胺、己二胺、癸二胺中的一种或几种接枝引入氨基；

(3)共沉淀制备磁性纤维素微球：将改性后的纤维素微球加入到Fe³⁺和Fe²⁺的混合液中，在强碱性条件下进行热共沉淀制得磁性纤维素微球；

(4)共价结合法固定化酶：以戊二醛为交联剂，对纤维素微球载体上的氨基进行活化，将活化后的磁性纤维素载体与酶液混合，使载体上的氨基与脂肪酶分子表面的氨基酸残基发生化学反应形成共价键，制得磁性纤维素微球固定化脂肪酶催化剂；

步骤(1)中所述的热熔胶转化法，其磺化温度为25～40℃，磺化时间6～10h；

步骤(1)中所述的反相悬浮技术，其分散相为变压器油400～600mL，分散剂为0.2～0.4g司班60和油酸钾0.05～0.1g，固化温度70～90℃，固化时间1.5～3.5h；

步骤(3)中所述的化学改性活化载体，环氧氯丙烷的用量为0.5～2mL/g，乙二胺的用量为1～3mL/g；

步骤(2)中所述的共沉淀，其所用Fe³⁺和Fe²⁺摩尔量比为2:1，共沉淀温度为50～60℃，加碱液调pH＝9～11；

步骤(4)中所述的共价结合法固定化酶，戊二醛的用量为3～10％，酶液浓度为10～20％，pH值为6.5～8.0，固定化时间5～8h。