[发明专利]一种光控荧光蛋白标记生物组织包埋样品的荧光控制方法有效
| 申请号： | 201610967351.9 | 申请日： | 2016-10-31 |
| 公开（公告）号： | CN106525792B | 公开（公告）日： | 2019-07-09 |
| 发明（设计）人： | 吕晓华;刘秀丽;张其;郭文炎;杨雄;曾绍群 | 申请（专利权）人： | 华中科技大学 |
| 主分类号： | G01N21/64 | 分类号： | G01N21/64 |
| 代理公司： | 华中科技大学专利中心 42201 | 代理人： | 许恒恒 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 激活 荧光 生物组织 包埋 光控 荧光蛋白标记 样品表层 激发光 轴向分辨率 荧光成像 荧光蛋白 荧光层析成像 光激活 上表面 波长 激发 应用 | ||
1.一种适用于宽场成像的光控荧光蛋白标记生物组织包埋样品的荧光控制方法，其特征在于，用激活光激活样品表层的光控荧光蛋白，用激发光激发所述表层的光控荧光蛋白进而发出荧光；
所述光控荧光蛋白为光激活荧光蛋白或光转换荧光蛋白；
所述激活光为与所述光控荧光蛋白匹配的特定波长的激活光；所述激发光为与所述光控荧光蛋白匹配的特定波长的激发光；所述激活光的波长短于所述激发光的波长；
所述表层的厚度为0.5～5微米；
所述激活光的方向和样品上表面的夹角为0～90°；
所述生物组织包埋样品的包埋剂中添加有吸收光的物质；
该荧光控制方法中，激活时只激活生物组织包埋样品表层的荧光，应用于生物组织包埋样品的荧光层析成像时，激发光激发被激活表层而进行荧光成像，样品被激活表层的厚度即为荧光成像的轴向分辨率；
在用激活光激活样品表层的光控荧光蛋白时，由于只激活包埋样品的表层，而表层以下没有被激活光激活，因此表层以下组织即使吸收了后续的激发光也无法发出荧光，从而避免了后续宽场成像时组织表层以下非焦面荧光的干扰。
2.如权利要求1所述的荧光控制方法，其特征在于，所述激活光的方向和样品上表面的夹角为15°～30°。
3.如权利要求1所述的荧光控制方法，其特征在于，所述生物组织包埋样品的包埋剂为树脂。
4.如权利要求3所述的荧光控制方法，其特征在于，所述树脂为丙烯酸树脂。
5.如权利要求1所述的荧光控制方法，其特征在于，所述吸收光的物质为苏丹黑。
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