[发明专利]通过基因编辑特异靶向肌肉组织MSTN治疗恶病质

说明书

本发明提供了通过基因编辑特异靶向肌肉组织MSTN治疗恶病质。具体地，本发明提供了用于治疗的恶病质的核酸构建物、表达载体和药物组合物。实验证明，本发明可有效地缓解和治疗恶病质。

技术领域

本发明涉及医疗领域，更具体地涉及通过基因编辑特异靶向肌肉组织MSTN治疗恶病质。

背景技术

恶病质(cachexia)可见于多种疾病，包括肿瘤、严重创伤、手术后、吸收不良及严重的败血症等，其中以肿瘤伴发的恶病质最为常见，称为肿瘤恶病质。

恶病质是许多癌症患者(尤其是在疾病晚期阶段)所显示的一种消耗型综合征。恶病质的特征包括：尽管有足够的营养摄入，但是仍发生骨骼肌质量的损失(同时伴随有或不伴随脂肪的减少)。癌症恶病质与生活质量下降，功能表现和生存率下降有关。

现有的研究表明，与癌症相关的肌肉损失是一种独立预测因子，可用于预测与死亡率上升相关的不良结果。此外，与癌症相关的肌肉损失也与不耐受化疗相关。然而，由于恶病质的成因非常复杂，因此目前尚缺乏令人满意的有效治疗手段。

肌肉消耗伴随衰老和多种分解代谢疾病发生，例如癌症、糖尿病、慢性肾脏疾病和心力衰竭，这可导致生活质量显着降低和疾病死亡率增加。

综上所述，本领域迫切需要有效的治疗恶病质的方法和药物，以便对恶病质或其相关症状(如与癌症相关的肌肉萎缩)进行预防、延迟或治疗，从而改善患者的生存质量和提高生存率。

发明内容

本发明的目的就是提供一种有效的治疗恶病质的方法和药物。

在本发明的第一方面，提供了一种核酸构建物，所述的核酸构建物具有式I结构：

A-B-C-D-E

式I

式中，

A为第一启动子；

B为NLS编码序列；

C为Cas9蛋白的编码序列；

D为第二启动子；

E为引导RNA的编码序列，其中所述的引导RNA是靶向Mstn的引导RNA。

在另一优选例中，所述的第一启动子为肌肉组织特异性启动子。

在另一优选例中，所述的肌肉组织特异性启动子包括：dMCK启动子、tMCK启动子、CK6启动子。

在另一优选例中，所述的Cas9蛋白选自下组：SaCas9蛋白、SpCas9蛋白。

在另一优选例中，所述的Cas9蛋白为SaCas9蛋白。

在另一优选例中，所述的第二启动子选自下组：组成型启动子、诱导型启动子、组织特异性启动子。

在另一优选例中，所述的第二启动子包括：小鼠或人类U6启动子、tRNA启动子。

在另一优选例中，所述的引导RNA的序列如SEQ ID NO.:5所示。

在另一优选例中，所述的肌肉生长抑制素(myostatin)来自人、非人灵长动物、或啮齿动物。

本发明第二方面，提供了一种表达载体，所述的表达载体含有本发明第一方面所述的核酸构建物。

在另一优选例中，所述的表达载体包括病毒载体。

在另一优选例中，所述的表达载体选自下组：慢病毒载体、腺相关病毒载体、腺病毒载体、或其组合。

在另一优选例中，所述的表达载体为8型腺相关病毒。