[发明专利]基因敲除动物作为皮肤屏障功能障碍动物模型的应用

说明书

技术领域

本发明一种新型动物模型，特别涉及基因高阶动物作为皮肤屏障功能障碍动物模型的应用。

背景技术

皮肤是机体最直接与外界接触的器官，也是人体最大的器官，覆盖于整个体表，起到了重要的屏障作用。作为机体重要的物理/机械屏障，一方面，它在一定程度上可以阻止外界不利因素(物理、化学、生物等)进入人体，保护着体内各种器官和组织免受外界物质侵袭；另一方面，可以避免人体表皮及真皮内水分及脂类等物质的丢失，从而保持机体内环境的相对稳定。

研究表明，特异性皮炎(atopic dermatitis，AD)、鱼鳞病、银屑病、接触性皮炎、玫瑰痤疮、湿疹等多种皮肤病的发生都与皮肤屏障功能的稳定有关。因此，皮肤屏障功能一直以来都是皮肤科临床工作中十分关注的热点。如：引起皮肤屏障功能破坏最常见的疾病--特异性皮炎，是一种慢性的、反复发作的炎症性皮肤疾病，目前有10％-20％的儿童受此疾病困扰[Carroll CL,Balkrishnan R,Feldman SR,Fleischer AB Jr,Manuel JC.The burden of atopic dermatitis:impact on the patient,family,and society.Pediatr Dermatol.2005；22(3):192-199.]。

皮肤表皮最外层的角质层(stratum corneum)，是皮肤的第一道屏护门，在皮肤屏障中起着至关重要的作用。机体90％的皮肤屏障功能依靠角质层完成。角质层由退化的角质形成细胞层叠交错构成，在皮肤不同位置，角质层有不同的厚度，约5～20层细胞，厚度约10～15微米“砖墙模型”是现在公认的表皮角质层屏障结构模型。角质层屏障的主要成分是角质套膜(砖)(Cornified envelop)和胞间的脂质双分子层(泥)(Intercellular lipid)；角质套膜由占角质层80％的兜甲蛋白(loricrin，LOR)、内披蛋白(involucrin,IVL)和丝聚合蛋白(filaggrin，FLG)等相互交联形成不溶性致密结构[Kalinin,A.E.,Kajava,A.V.and Steinert,P.M.2002.Epithelial barrierfunction:assembly and structural features of the cornified cellenvelope.Bioessays 24:789.]。

FLG是表皮颗粒细胞角质透明蛋白颗粒的主要成分，位于人类染色体1q2u1，即所谓的表皮分化复合体里面。越来越多的研究表明FLG基因表达异常(降低)会导致一些以皮肤干燥和皮肤屏障功能受损的疾病，如特异性皮炎(atopic dermatitis，AD)和寻常型鱼鳞病。许多类型鱼鳞病的研究发现表皮异常分化与染色体1q21有关，因此证明了鱼鳞病的发生与FLG的基因表达缺失有关[Zhong W，Cui B，Zhang Y，et al.Linkage analysis suggests a locus of ichthyosis vulgaris on 1q22.J Hum Genet，2003，48:390-392.]。在对特异性皮炎(AD)患者皮肤的表达谱研究中发现，FLG,LOR,IVL基因表达明显降低，深入的研究认为：尤其是FLG基因表达异常(下调)成为AD患者皮肤屏障功能破坏的主要原因之一[Hitokazu Esaki,David A.Ewald,Benjamin Ungar，Krueger，Emma Guttman-Yassky.Identification of novel immune and barrier genes in atopic dermatitis by means of laser capture microdissection,J ALLERGY CLIN IMMUNOL,2015:135；153-163.][Katherine Grey,Sheilagh Maguiness.Atopic Dermatitis:Update for Pediatricians,PEDIATRIC ANNALS,2016:45；280-286.]。