[发明专利]单克隆抗体STRO-4

说明书

本发明涉及一种称为STRO‑4的单克隆抗体及其用于富集诸如间充质前体细胞(MPC)的多潜能细胞的用途，所述单克隆抗体特异性结合人和绵羊HSP‑90β。

本申请是2009年8月18日提交的题为“单克隆抗体STRO-4”的中国专利申请200980141163.9的分案申请。

技术领域

本发明涉及热休克蛋白-90β(HSP-90β)作为鉴定和/或分离多潜能细胞的标记物的用途。更具体地，本发明涉及特异性结合人和绵羊HSP-90β的单克隆抗体(称为STRO-4)的鉴定。本发明还涉及通过本发明的方法富集的细胞群和这些细胞的治疗用途。

发明背景

包含造血支持性骨髓基质和相关骨组织的细胞组分源自一群多潜能细胞，该多潜能细胞包括多潜能间充质干细胞(MSC)和它们的前体(间充质前体细胞(MPC))。MPC存在于主要位于环绕血管的血管周围生态位的骨髓空间中(Gronthos S et al.,2003和Shi S etal.,2003)。在过去二十年中，研究集中于不同人基质/间充质细胞群重建脂肪、骨、软骨和肌肉的再生潜能(Gronthos S et al.,2003和Simmons PJ et al.,1991)。但是，这些技术的成功应用取决于以下能力：分离纯化的MPC群，以及随后离体控制它们的生长和分化。此外，需要克服通常与基于干细胞的疗法有关的各种技术和安全性顾虑，这通过在合适的大量人疾病临床前动物模型代表中评价MPC制品(preparation)的安全性和功效实现。人矫形和心脏疾病/创伤的绵羊模型已得到广泛使用，因为绵羊与人解剖、生理、免疫学和胚胎发育具有相似性(Airey JA et al.,2004；Liechty KW et al.,2000和Mackenzie TC etal.,2001)。

同时，数种人多潜能细胞特异性标记物如STRO-1、CD106、CD146已经在文献中进行了描述(Gronthos S et al.,2003和Shi S et al.,2003)，在人疾病绵羊模型中检查多潜能细胞的治疗潜力的显著进展受到限制，这是因为缺乏允许分离和表征绵羊组织中等同的多潜能细胞群的特异性试剂。诸如单克隆抗体的与绵羊和人多潜能细胞均反应的生物学试剂的开发分别会极大促进在临床前和临床试验中监测和等同绵羊和人多潜能细胞群的功能性的能力。

已包括在本说明书中的关于文献、法规、材料、装置、论文等的任何讨论只是为了提供本发明的背景。其不应被视作承认任何或全部这些内容由于存在于本申请每项权利要求的优先权日之前而构成现有技术基础的一部分或是本发明相关领域的公知常识。

发明概述

本发明描述了一种称为STRO-4的新单克隆抗体(mAb)的产生和表征，该单克隆抗体从未分级的绵羊和人骨髓鉴定和分离多潜能细胞。具体地，STRO-4抗体能够在两个物种中基本上分离全部产克隆多潜能细胞(CFU-F：成纤维细胞集落形成单位)。分离的多潜能细胞表现出高增殖潜能和多谱系分化。

出人意料的，本发明人发现热休克蛋白-90β(HSP-90β)蛋白在体内多潜能细胞的细胞表面表达，并且据发现单克隆抗体STRO-4鉴定HSP-90β上表达的独特表位。

因此，在一实施方案中，本发明提供了HSP-90β作为鉴定和/或富集多潜能细胞的标记物的用途。

在一实施方案中，本发明提供了一种富集多潜能细胞的方法，所述方法包括从组织来源制备细胞样品并且富集表达所述HSP-90β标记物的细胞。

在本发明的一实施方案中，多潜能细胞是成体多潜能细胞。

在一实施方案中，本发明的富集的细胞群没有被体外培养。

在另一实施方案中，本发明的富集的细胞群能够产生产克隆CFU-F。