[发明专利]一种奥贝胆酸有关物质的检测方法

说明书

本发明提供了一种分离度好、检测有关物质多、检测效率高的奥贝胆酸有关物质的检测方法。该方法可以提高奥贝胆酸相关原料和制剂产品的检测效率和检测精度，为保证药品质量和用药安全提供了方法保障。

技术领域

该发明涉及药物检测领域，具体为一种奥贝胆酸有关物质的检测方法。

背景技术

奥贝胆酸(Obeticholic Acid)又名6-乙基鹅去氧胆酸，是人初级胆汁酸中鹅脱氧胆酸(CDCA)的一种新型衍生物，为法尼酯衍生物X受体(FXR)的天然配体。奥贝胆酸属法尼醇X受体激动剂，通过活化法尼醇X受体，间接抑制细胞色素7A1(CYP7A1)的基因表达。由于CYP7A1是胆酸生物合成的限速酶，因此奥贝胆酸可以抑制胆酸合成，用于治疗原发性胆汁性肝硬化和非酒精性脂肪性肝病。奥贝胆酸由美国Intercept制药公司研发成功，是二十年来首个研发用于治疗胆汁淤积性肝病的药物，已于2016年5月被FDA批准上市。

药物的杂质是指药物中存在的无治疗作用或者影响药物的稳定性、疗效、甚至对人体健康有害的物质，在药物生产过程中，杂质的主要来源包括两个方面：1、由于所用原料不纯或者原料反应过程中反应未完全，以及反应的中间产物、反应的副产物等造成药品原料中杂质的存在，被统一称为有关物质；2、由于原料生产过程中反应的溶媒、催化剂等溶剂的残留所造成的杂质。药物的杂质与药品安全性的关系是一个受多因素影响的复杂关系，通常药物中的杂质大多具有潜在的生物活性，有的甚至与药物相互作用从而影响药物的效能和安全，严重的可能产生毒性作用。药物中的所有杂质都会不同程度地影响药物的稳定和安全，因此在药物的研究、生产、贮存和临床应用等方面，必须保证药物的纯度，降低药物的杂质，才能保证药物的有效和安全。

在奥贝胆酸的合成过程中会产生多个重要的有关物质杂质，这些有关物质如果过多引入药物成品中，将会导致严重的用药安全性问题。因此，在原料药合成阶段和制剂阶段都需要对这些有关物质进行严格控制。薄层色谱法作为一种半定量方法，同时由于灵敏度受操作条件影响较大，所以有时难以满足快速、准确分析的需要。对此，有专利文献CN105294801A报道了高效液相色谱法，其采用条件为十八烷基硅烷键合硅胶柱、0.1％甲酸水溶液和乙腈为流动相、柱温为20～35℃、流动相流速为0.5～1.0ml/min、梯度洗脱方式进行分析，检测器为蒸发光散射检测器。但该方法仅能检测出奥贝胆酸样品中的部分杂质，存在杂质检测不全的现象，且一些杂质间的分离度不高，无法实现准确分析。因此寻求一种能够有效分离且尽可能多的检出奥贝胆酸中有关物质的高效液相色谱法，对于奥贝胆酸的精确质量控制具有十分重要的意义。

发明内容

本发明的目的在于为解决上述技术问题，本发明提供一种分离度好、检测有关物质多、检测效率高的奥贝胆酸有关物质的检测方法，其包含以下步骤：

取奥贝胆酸供试品溶液进样，按照液相色谱条件进行检测，其中所用高效液相色谱条件为：色谱柱十八烷基硅烷键合硅胶柱；流动相A为三氟乙酸水溶液，流动相B为三氟乙酸乙腈溶液，采用梯度方式洗脱。

本发明所提供的奥贝胆酸有关物质的检测方法，其中所述梯度洗脱程序为：