[发明专利]一种多肽及其在制备治疗和预防肿瘤的药物中的应用

说明书

本发明公开了一种特异性结合TRB3的多肽及其在制备治疗和预防肿瘤的药物中的应用。所述多肽的氨基酸序列如将序列表SEQ ID No.8所示的氨基酸序列中的两个或两个以上的氨基酸替换为使其他侧链相连的非天然氨基酸所示。所述多肽能够特异性地与TRB3结合，从而阻断TRB3和P62蛋白的相互作用，因此应用于治疗和预防肿瘤的药物的制备中。所制备的药物在治疗肿瘤疾病中，具有疗效显著，毒副作用少，使用安全的优点。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种多肽及其在制备治疗和预防肿瘤的药物中的应用。

背景技术

TRB3(Tribbles Homologue 3)是Tribbles同源蛋白家族成员之一，参与调节发育过程中细胞的增殖、迁移及形态形成。TRB3作为假激酶蛋白家族成员，具有接头蛋白样的功能，参与多种蛋白复合体的组装。多项研究认为，TRB3可以与多种转录因子、泛素连接酶、细胞膜上II型BMP受体以及MAPK、PI3K信号通路成员蛋白发生相互作用，参与糖脂代谢、脂肪细胞分化、凋亡和应激等的调控。近来，多种证据表明，TRB3在多种肿瘤细胞系和人肿瘤组织中呈现高表达，并且在肿瘤的发展过程中发挥重要的促进作用。研究发现，TRB3通过与自噬货车蛋白p62发生相互作用，抑制细胞的自噬活性，促进肿瘤细胞的增殖和转移。由此可见，靶向TRB3与p62之间的相互作用是治疗肿瘤的一个潜在靶点。因此，研究和开发阻断TRB3与P62蛋白相互作用的物质，具有很好的抑制肿瘤发生和发展的成药前景。

蛋白-蛋白相互作用(PPIs)在许多生物过程中扮演着重要的角色，例如细胞的增殖、生长、分化及程序性死亡。人类疾病中许多潜在的治疗靶标主要是蛋白-蛋白相互作用。在蛋白-蛋白相互作用的过程中，α螺旋和β折叠二级结构是参与PPIs的主要接触面单元。近年来，用化学合成方式得到高活性、高选择性的合成多肽类药物已经成为新的研究热点。然而，多肽与作用蛋白的结合能力非常弱，普通的线性多肽不能透过细胞膜且易被蛋白酶水解。因此，多肽类靶点药物目前还有很多不足。由上可知，亟待获得靶向TRB3与p62之间的相互作用的，高活性、高选择性的合成多肽类药物。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是针对目前缺乏靶向TRB3与p62之间的相互作用的，高活性、高选择性的合成多肽类药物的现状，提供一种特异性结合TRB3的多肽及其在制备治疗和预防肿瘤的药物中的应用。

本发明的发明人经过深入的研究和反复的试验发现，靶向TRB3与p62蛋白相互作用的多肽A2(氨基酸序列参见序列表SEQ ID No.8)与TRB3的特异性结合能力和生物稳定性都比较低。而其与多肽A2在溶液中不能稳定形成活性所需的α螺旋构象直接相关。由此，发明人进行了针对性的研究和试验，发现如果将多肽A2中特定位置的氨基酸残基替换为侧链可以相连的非天然氨基酸，如S-戊烯丙氨酸(S5)，则改造后的多肽具有稳定的α螺旋的二级结构，使改造后的多肽具有极高的亲和力、抗酶解稳定性以及细胞穿膜性，即提高其α螺旋稳定性、TRB3结合能力和代谢稳定性，抑制多种肿瘤细胞增殖和转移。经实验验证，改造后的多肽能够应用于制备治疗和预防肿瘤的药物中。基于发明人的研究工作，本发明提供下述的技术方案。

本发明提供的技术方案之一是：一种特异性结合TRB3的多肽，所述多肽的氨基酸序列如将序列表SEQ ID No.8所示的氨基酸序列中的两个或两个以上的氨基酸替换为侧链可相连的非天然氨基酸所示。

所述的使其他侧链相连的非天然氨基酸为本领域常规的非天然氨基酸，较佳的为S-戊烯丙氨酸(S5)。

较佳的，所述的多肽中，所述替换的氨基酸的数目为两个且所述替换的氨基酸的位置分别为第i位和第i+3位，或者，为第i位和第i+4位，其中1≤i≤7，i为正整数。

更佳的，所述的多肽的氨基酸序列如将序列表SEQ ID No.1、SEQ ID No.2、SEQ IDNo.3、SEQ ID No.4、SEQ ID No.5、SEQ ID No.6和SEQ ID No.7中任一项所示。