[发明专利]一种延长血小板体外保存时间的肽产品

说明书

本发明涉及一种调节血小板活性的药物组合物、试剂盒、其筛选方法和在预防或治疗血栓性血小板减少性紫癜等血小板生存期缩短相关疾病以及延长血小板体外保存时间中的应用。其中本发明公开了一种抑制血小板线粒体自噬的药物组合物，其可以抑制血小板中FUNDC1与LC3相互作用，抑制血小板线粒体自噬，保持血小板的活性，包括具有FUNDC1的LIR结构域的可穿膜寡肽。特别地，本发明还涉及一种以线粒体FUNDC1和LC3相互作用为靶点的药物筛选方法，通过所述方法可筛选出能够抑制FUNDC1和LC3相互作用并调节线粒体自噬和血小板活性的药物，该药物用于预防或治疗血栓性血小板减少性紫癜等血小板生存期缩短相关疾病或延长血小板体外保存时间，具有良好的临床应用前景。

技术领域

本发明属于血液病学范畴和生物制造领域，涉及调节血小板活性和延长血小板体外保存时间的药物和药物筛选方法。本发明还涉及该药物在保护血小板活性和延长血小板体外保存时间中的用途。

背景技术

线粒体是控制细胞能量代谢的重要的细胞器，也是细胞凋亡的调控中心，在凋亡因子的刺激下线粒体通过释放细胞色素C等凋亡相关分子来启动细胞凋亡过程。同时，线粒体也是细胞自由基产生中心。鉴于线粒体在细胞生命活动中的这些重要作用，受损伤的或不需要的线粒体必须被有效清除，以保证细胞正常生命活动的进行。线粒体自噬(Mitophagy)就是这样一种通过自噬机制选择性清除受损伤或不必需的线粒体的过程。线粒体自噬还可能参与红细胞(哺育动物红细胞没有细胞核和线粒体)的发生和成熟过程。线粒体自噬的异常也可能与神经退行性疾病，糖尿病和肿瘤的发生有密切关系。

线粒体上存在几种蛋白质受体，包括酵母Atg32以及哺乳动物系统 NIX/BNIP3L、BNIP3和FUNDC1，都在线粒体自噬中直接发挥作用。 NIX/BNIP3L、BNIP3和FUNDC1通过LC3互作区域(LIR)直接结合 LC3(哺乳动物中Atg8同系物)进而激活线粒体自噬。

FUNDC1，一个新的介导哺乳动物细胞线粒体自噬的受体分子，它定位在线粒体外膜上，并通过特有的LIR保守的结构域与自噬的关键分子LC3相互作用来介导低氧诱导的线粒体自噬。此前的研究显示，LC3 与线粒体自噬受体FUNDC1之间存在重要的相互作用，后者存在一个 LC3相互作用区(LIR)，这一相互作用对于线粒体自噬选择性过程必不可少。LIR保守结构域的突变或缺失能够抑制其与LC3的相互作用和线粒体自噬。深入的研究还表明Fundc1的磷酸化在线粒体自噬调控中发挥了关键作用。

循环血液中的血小板是包含线粒体、内质网、溶酶体等细胞器的无核血细胞。血小板是参与止血、血栓形成、特别是动脉血栓形成的主要有形成份。近几年的研究发现，血小板作为起源于巨核细胞的一种无核细胞，同样表达死亡受体、半胱氨酸蛋白酶caspases及Bcl-2蛋白家族等凋亡调控蛋白，可发生凋亡，血小板寿命降低。现有国内外临床上只是从抑制血小板凋亡的角度提高血小板体外保存时间。

目前，针对线粒体自噬和血小板功能之间的报道并不多见，曾报道过抑制细胞自噬性降解会减弱血小板的聚集和粘附功能，申请号为 CN200780033800.1中曾公开了多种增强或保持血小板的生存能力或寿命期的方法，该方法包括施用对细胞凋亡进行负调控的制剂。但对血小板中线粒体自噬的调控的药物用于血小板体外储存期或调控血小板活性的应用未见报道，且由于线粒体自噬和血小板生存期的现象和分子机制未知，因此通过调控细胞线粒体自噬，筛选影响血小板体外储存期或血小板活性的药物，将有利于开发具有临床应用价值的新型药物。

发明内容

基于以上问题，本发明研究发现，在血小板发生凋亡前，血小板功能特别是其线粒体功能都已发生了功能障碍，导致血小板功能大大降低，进而引起其储存期大大缩短。因此，本发明从另一全新角度提高血小板的体外保存质量和时间，大大提高医用血小板体外储存期和保护血小板活性。

本发明一方面公开了一种保持或调节血小板活性的药物组合物，其中，所述药物组合物包括能抑制血小板线粒体自噬的药物和药学上可接受的载体。