[发明专利]一种金银花中木犀草素的含量测定方法

说明书

技术领域

本发明属于药物含量的检测方法，具体涉及一种金银花中木犀草素的含量测定方法 。

背景技术

木犀草素（luteolin）是一种天然黄酮类化合物，存在于全叶青兰、辣椒、野菊花、金银花、紫苏等多种植物中。具有多种药理活性，如消炎、抗过敏、抗肿瘤、抗菌、抗病毒等，其中以镇咳和祛痰作用最为显著，临床主要用于止咳、祛痰、消炎、治疗心血管疾病、治疗“肌萎缩性脊髓侧索硬化症”，SARS，肝炎等。木犀草素提纯物为黄色针状结晶，熔点328-330℃。微溶于水，具弱酸性，可溶于碱性溶液中，正常条件下稳定。

由于木犀草素良好、广谱的药理作用，目前多个制剂中含有木犀草素，并且药品的质量以木犀草素的含量高低作为一个评价标准，故制定一种金银花中木犀草素的含量测定方法 可以有效的控制药品中木犀草素的含量，进而评价药品质量。

忍冬藤为忍冬科植物忍冬（Lonicera japonica Thunb）的干燥茎枝，我国忍冬属植物资源丰富，共有98种，分布于全国各个省区，尤以西南各省最多。忍冬藤收载于2010年版一部，具有清热解毒、疏风通络功能。临床用于温病发热、热毒血痢、痈舯疮疡、风湿热痹。中国药典2010年版一部将绿原酸作为忍冬藤质量控制的指标，但忍冬藤除了含绿原酸外，还含有环烯醚萜苷类、黄酮类、皂苷类等成分，现代药理研究表明忍冬藤中有机酸和黄酮类均有明显的生理活性，绿原酸和咖啡酸具有显著的抗菌作用，木犀草素等黄酮类化合物具有抗炎、抗菌、抗病毒、抗癌等多种药理作用，现已备受人们关注，因此，仅以绿原酸作为忍冬藤质量控制的指标，存在一定的局限性，有必要建立多指标评价该药材质量的分析方法，为此，我们经过不断地研究摸索，建立了忍冬藤中木犀草素的含量测定方法，并对三批忍冬藤药材进行了含量测定，结果显示该方法简单、快速、可靠，可用于忍冬藤药材的质量控制。

发明内容

本发明的目的是提供一种金银花中木犀草素的含量测定方法 ，采用高效液相色谱法，简便快速、通用性强，出峰快，省时省力，经济环保。

为实现上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：

所述方法采用的色谱条件为：

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱；以乙腈-0.5%磷酸溶液作为流动相（乙腈与0.5%磷酸溶液体积比为46:54）；柱温为30℃ ；检测波长为350nm；流速为1.0mL/min ；进样量为20μL。

本发明有益效果

本发明提供的方法能准确有效的测定金银花中木犀草素的含量，误差小，可作为监控金银花药材的质量指标，确保金银花药材的质量和临床效果，适于实验室及工业生产应用。

具体实施方式

、仪器与条件

日本岛津LC-10ATVP 泵，岛津SPD-10AVP 紫外可见光多波长检测器，RHEODYNE 7725i 进样器及TL9900 色谱数据工作站；色谱条件如下：

色谱柱选用十八烷基硅烷键合硅胶柱；

以乙腈-磷酸溶液作为流动相，所述乙腈的质量分数为46%，磷酸溶液的浓度为0.5%；柱温为30℃ ；检测波长为285nm；流速为1.0mL/min ；进样量为20μL；

2、试验药物：金银花药材3批，来源于四川某中药材公司、木犀草素对照品，来源于中国药品生物制品鉴定所。

、检测方法：

3.1 供试品溶液的制备：精密称取干燥的金银花样品5g，置索氏提取器中，加入120ml的石油醚，浸泡12h，70℃水浴中提取至无色，挥干石油醚，之后加入100ml甲醇，超声提取3次，过滤、浓缩提取液，定容至5ml的容量瓶中，用0.45μm滤膜过滤，即为测定木犀草素的供试品溶液，备用。

3.2 对照品溶液的配制

精密称取木犀草素对照品适量，用乙腈溶解稀释，制备成每ml含木犀草素。1μg的对照品溶液，即可。

3.3 测定法：分别吸取对照品溶液和供试品溶液各20µl，每个供试品做5个平行，注入液相色谱仪，测定，按外标法计算，即得。

、检测结果

3批金银花药材中木犀草素的含量分别为：0.00246%、0.00239%、0.00237%。含量复合中国药典要求。

、线性关系的考察