[发明专利]作用于伤残组织原位的骨与软组织同步再生诱导剂

说明书

技术领域

本发明属于再生医学领域的原位再生诱导部分。本发明诱导的再生为多组织的器官性再生，既有骨组织的再生，也有肌肉、血管、包括皮肤等的骨周围软组织的再生。本发明可用于离体的残损，如断指/断肢的再生(一般指离体的原组织不可用的情况)；也可用于非离体的残损，如骨缺损/骨不连接的再生。

背景技术

蚯蚓、水蛭等低等生物有强大的再生能力，蜥蜴、蝾螈和青蛙等两栖动物的前后肢或尾巴切除后可完全再生。哺乳动物的再生能力弱，鹿茸等少量哺乳动物的附属器官可完全再生，人类和鼠(啮齿类)的末节指/趾(Phalange3，P3)有不完全的再生能力，即远端切除后可再生，但近端切除不可再生。中节指/趾(Phalange2，P2)等其余指/趾及上下肢切除后不可再生。本发明以细胞外基质(ECM)和骨形态蛋白(BMP)诱导残损组织的骨性再生，效果显著。

发明内容

本发明要解决的问题是：诱导无再生能力的断指/断肢的骨性再生，或将末节指的不完全再生转变为完全再生，或实现其它骨缺损/骨不连接的再生性修复。新/旧创伤均适用。

诱导剂组成：

a.细胞外基质(ECM，extracellular matrix)。

b.骨形态蛋白(BMP，bone morphogenetic protein)。

c.骨形态蛋白BMP的稀释液。

诱导剂制备：

1.将b用c液稀释成适当浓度，浓度范围0.01～1000μg/ml。

2.将稀释好的b液与a混合，混合比例为b∶a＝1∶1～1000。

3.将a与b的混合物塑形为拟再生的骨的形状。诱导剂制备完成。

4.制备环境清洁无菌，诱导剂的各组分在制备前需经无菌化处理。

诱导剂的效果：

小鼠P2(中节趾)切除实验表明，在被切除的原组织弃之不用的情况下，该诱导剂可在断趾残端诱发骨和肌肉、皮肤等软组织的同步再生，从而延长残趾的长度，也可增加残趾的厚度。再生的骨组织为带有孔隙结构的骨，骨表面凸凹不平，随着时间的推移，再生骨内的孔隙结构减少，骨表面趋于光滑。

附图说明

图1是正常鼠趾的外观图(腹侧面，即掌心侧)。

中间趾(“中指”)不做切除，两侧趾(“食指”和“无名指”)做切除，切除位置为两侧趾的第2条趾纹线，箭头表示切除位置。中间趾的第3条趾纹线与两侧趾的第二条趾纹线(箭头所示)平齐，故中间趾的第三条趾纹线可用作两侧趾再生长度的参照坐标。图1的标号说明：①切除位置。②切除位置

图2是小鼠中节趾P2切除后35天的外观及其透明标本图。

图2-1是外观图。

图2-2是透明标本图。

左侧趾(“无名指”)有诱导剂植入，右侧趾(“食指”)无诱导剂为对照趾。透明标本用于观察骨。单箭头表示切除位置，双箭头表示P2趾骨的长度。诱导剂趾骨的长度约为对照趾趾骨长度的2倍。图2-1、图2-2为同一样品，所用诱导剂为低剂量诱导剂。图2-1的标号说明：①诱导剂趾的切除位置。②切除后加诱导剂的再生趾。③未损伤的正常趾(“中指”)。④切除后不加诱导剂的对照趾。⑤对照趾的切除位置。图2-2的标号说明：①诱导剂趾的切除位置。②切除后加诱导剂的再生趾。③再生的P2骨的长度。④未损伤的正常趾(“中指”)。⑤切除后不加诱导剂的对照趾。⑥对照趾的切除位置。⑦对照趾P2骨的长度。

图3是过量再生的P2鼠趾micro-CT成像及透明标本图(不同样品)。

图3-1是micro-CT图(切除后50天)。

图3-2是透明标本图(切除后34天)。

图3-3是透明标本图(切除后35天)。

再生的P2趾骨与正常中间趾的P2趾骨长度相当，再生趾的厚度等于或大于正常中间趾。鼠的正常中间趾，相当于人的“中指”，其P2趾骨最长。以上表明再生P2趾的骨量大于原P2趾，为过量的鼠趾再生。单箭头表示切除位置，双箭头表示P2趾骨的长度。图3-1的标号说明：①诱导剂趾的切除位置。②再生的P2趾。③正常中间趾的P3骨。④正常中间趾的P2骨。图3-2的标号说明：①正常中间趾的P2骨的长度。②再生的P2骨的长度。③诱导剂趾的切除位置。图3-3的标号说明：①诱导剂趾的切除位置。②正常中间趾的P2骨的长度。③再生的P2骨的长度。

具体实施方法

1.ECM可购买或自制。

2.BMP可购买或自制。