[发明专利]一种新型双重靶向基因载体在审

专利信息
申请号: 201610867498.0 申请日: 2016-09-30
公开(公告)号: CN107881199A 公开(公告)日: 2018-04-06
发明(设计)人: 马昆;富铎;于冬丽 申请(专利权)人: 大连理工大学
主分类号: C12N15/88 分类号: C12N15/88
代理公司: 大连理工大学专利中心21200 代理人: 梅洪玉,潘迅
地址: 124221 辽*** 国省代码: 辽宁;21
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摘要:
搜索关键词: 一种 新型 双重 靶向 基因 载体
【权利要求书】:

1.一种新型双重靶向基因载体,其特征在于,该新型双重靶向基因载体通过叶酸-聚乙二醇-磷脂FA-PEG2000-DSPE和地塞米松对载体进行修饰后,具有肿瘤细胞靶向性与细胞核靶向性;所述的新型双重靶向基因载体内部包载大量目的基因片段,能够高效的传递基因;所述的双重靶向基因载体表面为负电性,毒性降低。

2.权利要求1所述的新型双重靶向基因载体的制备方法,其特征在于,室温条件下,将eggPC、DOPE、FA-PEG2000-DSPE和地塞米松按照溶于氯仿后,置于茄型瓶中,氮气吹干,制备脂质薄膜;加入PCR组分液,涡旋震荡水化,将PCR组分液包裹在脂质囊泡中;最后采用PCR方法扩增目的基因片段,得到包载大量目的基因片段的新型双重靶向基因载体;所述的eggPC、DOPE、FA-PEG2000-DSPE和地塞米松的摩尔比为10:10:1:1。

3.根据权利要求1所述的新型双重靶向基因载体的制备方法,其特征在于,所述的PCR方法扩增的具体步骤为:①95℃反应30s;②95℃反应30s;③55℃反应2min;④72℃反应1min;⑤将步骤②~④重复20个循环;⑥72℃反应1min。

4.根据权利要求1或2所述的新型双重靶向基因载体的制备方法,其特征在于,所述的PCR组分液包括:0.1ng/μL的pDNA模板、0.025U/μL的Taq聚合酶、0.8μM的引物和0.2mM的dNTPs。

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