[发明专利]基于纳米模拟酶的可视化快速检测生物酶、蛋白质及其抑制剂的方法

权利要求书

1.一种非治疗诊断目的的基于纳米模拟酶的可视化快速检测生物酶活性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

1）纳米模拟酶的制备：利用湿法化学制备纳米氧化铈，经分离、纯化并测定其浓度后备用；

2）检测试剂缓冲液的制备：配制pH分别为7.0或4.5，浓度为5 mM 的磷酸缓冲溶液待用；

3）检测生物酶活性的检测试剂的制备：取一定量的3,3,5,5-四甲基联苯胺、ATP以及待测生物酶的反应底物乙酰胆碱溶液或尿素溶液加入到配制好的磷酸缓冲溶液中，混合均匀后待用；

4）生物酶活性的可视化检测：将上述检测试剂与含有待测检测生物酶的样品以及一定量的所述纳米模拟酶混合后在37℃下孵育反应，然后根据检测试剂颜色的变化或通过肉眼观察对待测生物酶的活性进行半定量的判断；或通过相应的仪器对待测生物酶的活性进行精确的测定和定量；

其中，所述生物酶为乙酰胆碱酯酶和脲酶中的一种，当所述生物酶为乙酰胆碱酯酶时，所述反应底物为乙酰胆碱溶液，所述检测试剂缓冲液的pH为7.0；当所述生物酶为脲酶时，所述反应底物为尿素溶液，所述检测试剂缓冲液的pH为4.5。

2.一种非治疗诊断目的的基于纳米氧化酶可视化快速检测生物酶抑制剂活性的方法，其特征在于，所述方法包括权利要求1所述的步骤1）~3），还包括步骤4）生物酶对应抑制剂的可视化检测：将已知活性的生物酶与对应的抑制剂混合后作用一段时间得到混合物，然后将该混合物与步骤2）的检测试剂缓冲液、步骤3）的检测试剂以及一定量的步骤1）的纳米模拟酶混合后在37℃下孵育反应，最后根据检测试剂颜色的变化或通过肉眼观察对待测生物酶的抑制剂进行半定量的判断；或通过相应的仪器对待测生物酶的抑制剂进行精确的测定和定量；

其中，所述生物酶为乙酰胆碱酯酶和脲酶中的一种，当所述生物酶为乙酰胆碱酯酶时，所述反应底物为乙酰胆碱溶液，所述检测试剂缓冲液的pH为7.0；当所述生物酶为脲酶时，所述反应底物为尿素溶液，所述检测试剂缓冲液的pH为4.5。