[发明专利]氯喹在促进脊髓损伤修复中的应用

权利要求书

1.氯喹在制备促进脊髓损伤修复的药物中的应用，其中氯喹如下式所示：

2.根据权利要求1所述的应用，其中氯喹通过抑制自噬调控的炎症实现。

3.根据权利要求2所述的应用，其中氯喹通过抑制自噬，从而抑制泛素化蛋白I-kBα降解，抑制NF-kB p65活化，从而抑制炎症，实现抑制自噬调控的炎症促进脊髓损伤修复的作用。

4.根据权利要求3所述的应用，其中泛素化蛋白I-kBα在p62介导的自噬调控炎症LC3-II-p62-I-kBα反应机制调控下降解，进一步地引入氯喹，以干预泛素化蛋白I-kBα的降解。

5.根据权利要求3所述的应用，其中利用免疫荧光法检测NF-kB p65活化水平，并检测炎症因子IL-6、TNF-α的表达量，比较各实验组脊髓组织中炎症因子的表达差异。

6.根据权利要求5所述的应用，其中RT-PCR检测M1型促炎性巨噬细胞相关基因iNOS、CD16、CD32、CD64、CD86及M2型抗炎症巨噬细胞相关基因Arginase I、CD14、CD23、CD163、CD206的表达水平，比较氯喹干预前后炎症因子的变化，进而来验证自噬对炎症水平的调控作用。

7.根据权利要求4所述的应用，其中通过蛋白质印迹法及免疫荧光检测自噬相关蛋白LC3-II、Beclin1、p62的表达水平及比较氯喹作用前后神经细胞的死亡水平，观察氯喹是否可以抑制细胞自噬，从而抑制神经元细胞凋亡，促进脊髓损伤修复。

8.根据权利要求4所述的应用，其中Western blot检测泛素化蛋白I-kBα的表达水平，另外IP免疫共沉淀检测自噬体LC3-II与p62及p62与泛素化蛋白I-kBα的相互作用以及用免疫荧光检测自噬体LC3-II与p62及p62与泛素化蛋白I-kBα荧光共定位水平，检测p62在泛素化蛋白I-kBα通过自噬途径降解中的作用，以检测对炎症的影响。