[发明专利]一种从动物胎及其胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法在审
申请号: | 201610844115.8 | 申请日: | 2016-09-02 |
公开(公告)号: | CN106699838A | 公开(公告)日: | 2017-05-24 |
发明(设计)人: | 庞海;刘爽;张鹤青;金家福;张全 | 申请(专利权)人: | 吉林金梓源生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C07K1/36 | 分类号: | C07K1/36;C07K1/34 |
代理公司: | 上海百一领御专利代理事务所(普通合伙)31243 | 代理人: | 马育麟 |
地址: | 136400 吉林省双辽市经济*** | 国省代码: | 吉林;22 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 动物 及其 胎盘 制备 活性 蛋白 干粉 方法 | ||
1.一种从动物胎及其动物胎盘制备活性蛋白肽冻干粉的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:
1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘,切碎后加入5-10倍体积的水,过夜浸泡除去血液成分,骨泥磨磨浆后,加入20-40倍体积的2-10%酸浸提6-12小时,14000转/离心,收集清液得蛋白肽粗品;
2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水,搅拌,调pH至中性或微碱性,得蛋白肽粗品中性或微碱性液。
3)蛋白肽粗品中性或微碱性液用0.2微米的滤膜过滤,过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3-5次,再浓缩到含蛋白肽4-10%,除菌过滤,冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。
上述的脱盐、浓缩步骤如下:先纳滤膜浓缩;然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的,反复3-5次;上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。
2.如权利要求1所述的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:
1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘,切碎后加入5-10倍体积的水,过夜浸泡除去血液成分,骨泥磨磨浆后,加入20-40倍体积的2-5%醋酸浸提8-12小时,14000转/离心,收集清液得蛋白肽粗品;
2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水,搅拌,调pH7-9.0,得蛋白肽粗品中性或微碱性液。
3)蛋白肽粗品中性或微碱性液用0.2微米的滤膜过滤,过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3次,再浓缩到含蛋白肽4-10%,除菌过滤,冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。
上述的脱盐、浓缩步骤如下:先纳滤膜浓缩;然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的,反复3次;上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。
3.如权利要求2所述的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:
1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘,切碎后加入5-10倍体积的水,过夜浸泡除去血液成分,骨泥磨磨浆后,加入20-40倍体积的2-5%醋酸浸提8-12小时,14000转/离心,收集清液得蛋白肽粗品;
2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水,搅拌,调pH7-7.5,得蛋白肽粗品中性液。
3)蛋白肽粗品中性液用0.2微米的滤膜过滤,过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3次,再浓缩到含蛋白肽4-10%,除菌过滤,冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。
上述的脱盐、浓缩步骤如下:先纳滤膜浓缩;然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的,反复3次;上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。
4.如权利要求3所述的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:
1)新鲜冷冻动物胎及其动物胎盘,切碎后加入5-10倍体积的水,过夜浸泡除去血液成分,骨泥磨磨浆后,加入20倍体积的3%醋酸浸提8-12小时,14000转/离心,收集清液得蛋白肽粗品;
2)蛋白肽粗品加3-5重量体积去离子水,搅拌,调pH7-7.5,得蛋白肽粗品中性液。
3)蛋白肽粗品中性液用0.2微米的滤膜过滤,过滤液用400-500道尔顿的纳滤滤脱盐3次,再浓缩到含蛋白肽4-10%,除菌过滤,冷冻干燥制备羊胎及其胎盘蛋白肽冻干粉。
上述的脱盐、浓缩步骤如下:先纳滤膜浓缩;然后加水稀释到原体积时再进行纳滤膜浓缩以达到脱盐的目的,反复3次;上述的纳滤膜为截留分子量在400-500之间的纳滤膜。
5.如权利要求1-4所述的方法,其特征在于所述方法包括以下步骤:将屠宰后的怀孕动物,连同胎盘取出包裹的胎儿,取新鲜动物胎及其胎盘10kg,切碎,加100升自来水,浸泡过夜,次日用清水反复冲洗3次,充分去除血水,用胶体磨磨浆,加入500升3%醋酸,搅拌浸提过夜。用14000转/分离心,收集清液。调pH7.4,用0.2微米的膜板筐过滤机过滤,穿过液用纳滤机浓缩到10升,再加入去离子水到30升,搅拌后纳滤浓缩,反复4次,最后浓缩到10升,冷冻干燥,得蛋白肽冻干粉0.2公斤。
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