[发明专利]同时分离克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的分子印迹柱

说明书

本发明提供一种能同时分离克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的三合一分子印迹柱，所述分子印迹柱中具有能分别识别分离克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的三种分子印迹聚合物。制备分子印迹微球的方法是采用在水相体系中进行悬浮聚合，得到分子印迹聚合物微粒可直接装柱使用，不需经研磨过筛。

技术领域：

本发明涉及一种分子印迹固相萃取柱，特别涉及能同时分离动物产品和饲料中克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的三合一分子印迹固相萃取柱。

背景技术：

“瘦肉精”是β2-受体激动剂类药物。利用分子印迹技术对瘦肉精进行检测，是将待检的瘦肉精化合物作为模板分子，采用功能单体分子与模板分子结合，交联剂和引发剂促使单体之间进行交联，从而得到针对特定模板分子的印迹化合物。目前，克伦特罗、莱克多巴胺和沙丁胺醇是违法滥用较严重的三种“瘦肉精”化合物。

目前用于检测瘦肉精的分子印迹柱多为每次只能检测一种瘦肉精化合物，没有有效解决样本中违法滥用较严重的三种瘦肉精分子的同时分离富集问题。如姜久英等CN102955012A用甲基丙烯酸作为单体分子，制备了克伦特罗的分子印迹整体柱。李建平等CN104945552A同样用甲基丙烯酸作为单体分子，合成了克伦特罗的分子印迹聚合物。这些专利只描述了克伦特罗分子的分子印迹材料的一种合成方法，还未涉及样本中的其他种类瘦肉精分子的净化。汤秩伟等CN104535759A描述了一种克伦特罗的仿生免疫柱，利用分子印迹材料装填，并且在柱中完成现场检测。在此发明中，克伦特罗的分子印迹材料作为一个样本中克伦特罗分子的捕获物，直接捕获待检样本中的克伦特罗分子并直接显色检测，不涉及到克伦特罗分子的分离纯化。

发明内容

本发明的目的是提供一种分子印迹固相萃取柱，可以同时从待检样本中分离并纯化克伦特罗、沙丁胺醇以及莱克多巴胺，用于单独或者同时分离分析饲料、动物尿液以及动物组织中的这三种最常见的瘦肉精类化合物。

本发明提供一种能同时分离克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的三合一分子印迹柱，其特征在于，所述分子印迹柱中具有能分别识别分离克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺的三种分子印迹聚合物。

克伦特罗、沙丁胺醇和莱克多巴胺三种分子印迹聚合物在柱管中装填的比例不限，本领域技术人员可根据实际需要确定用量。

当不能确定检测样本中三种瘦肉精类化合物比例时，三种分子印迹聚合物的优选比例(摩尔比)为：

克伦特罗聚合物:沙丁胺醇聚合物:莱克多巴胺聚合物＝1:1～1.5:1～1.5。

沙丁胺醇聚合物：莱克多巴胺聚合物用量可以较大的原因是：单一使用沙丁胺醇分子印迹聚合物也可以对克伦特罗有一定比例的富集，莱克多巴胺分子印迹聚合物只能对莱克多巴胺实现吸附富集。

本发明研究筛选制备所述三种分子印迹聚合物最合适的功能单体和交联剂，通过优化具体目标分析物与功能单体、交联剂的种类、用量比例，将优化结果确定如下：

表1本发明发现的最适合的功能单体和交联剂

三种分子印迹聚合物都是用偶氮二异丁腈作为引发剂。

实验中发现，不合适的功能单体和交联剂在制备聚合物时会导致聚合物微球粒径不均一，易凝结成块，进行装柱后吸附富集效果不理想。

本发明还发现，聚合物的微球直径对分离效果也有影响，不合适的粒径会导致装柱效果不理想，粒径过大或过小，会影响装柱后进行吸附试验时溶剂通过分子印迹柱的流速，从而导致吸附富集效果。本发明通过实验找到了三种分子印迹聚合物可用的微球直径是10-1005μm，优选的微球直径是20-60μm。

本发明的分子印迹柱中具有筛板，筛板的数量是2～4个。筛板的孔径在5μm到20μm之间。优选的筛板孔径是8-10μm。筛板的材质选自聚乙烯、高密度聚乙烯及聚丙烯，优选聚丙烯。